JNK、p300信号通路调节的自噬在姜黄素衍生物C66防治糖尿病肾病中的作用

In conditions of diabetic nephropathy(DN), cellular autophagy is insufficient. While the activation of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and histone acetyltransferase p300 negatively regulate autophagy. Our previous studies confirmed that curcumin analog C66 prevented diabetes-induced JNK phosphorylation, downregulated the activity of p300, and finally reduced the kidney damage. In addition, our pre-experimental data indicated C66 enhance the autophagy of glomerular mesangial cells cultured in high glucose (HG). Therefore, we hypothesized that C66 can prevent and therapy DN through inhibiting the negative regulation of JNK and p300 on autophagy. In this project, in order to observe the effects of autophagy mediated by Beclin 1 in the process of C66 preventing cellular injury, and to explore the regulation effects of p300 on cellular autophagy mediated by Beclin 1, firstly we plan to pretreat glomerular mesangial cells in mice with Beclin 1 siRNA and p300 siRNA respectively, and then give intervention with C66, culture the cells under the environment of HG. Then, the JNK gene knockout mice will be used to make diabetic model induced by STZ, and then C66 will be given lavage for 3 months. The aim is to conform the regulation effects of JNK pathway on p300 and cellular autophagy in the process of C66 preventing DN. Completion of this project will provide new strategies and ideas for the prevention and therapy of DN.

糖尿病肾病（DN）情况下，细胞自噬功能缺陷，而c-Jun氨基末端激酶（JNK）和组蛋白乙酰转移酶p300的激活负调控自噬。我们前期研究表明，姜黄素衍生物C66抑制糖尿病介导的JNK磷酸化及p300的活性，减少肾脏损伤。另外，C66增强高糖环境下（HG）的系膜细胞自噬。因此，我们推测C66可以通过抑制JNK、p300通路对自噬的负调控起到防治DN的作用。本项目首先分别应用Beclin 1 siRNA和p300 siRNA预处理小鼠肾小球系膜细胞，并给予C66干预，在HG环境下培养，明确自噬蛋白Beclin 1介导的细胞自噬在C66预防系膜细胞损伤的作用，并研究p300对Beclin 1介导的细胞自噬的调节作用。然后，应用JNK基因敲除小鼠STZ诱导糖尿病模型，并给予C66灌胃，探讨JNK通路对p300及细胞自噬的调节在C66防治DN中的作用。本项目的完成将为防治DN提供新的策略。

糖尿病肾病（DN）情况下，细胞自噬功能缺陷，而c-Jun氨基末端激酶（JNK）和组蛋白乙酰转移酶p300的激活负调控自噬。我们前期研究表明，姜黄素衍生物C66抑制糖尿病介导的JNK磷酸化及p300的活性，减少肾脏损伤。另外，C66增强高糖环境下（HG）的系膜细胞自噬。因此，我们推测C66可以通过抑制JNK、p300通路对自噬的负调控起到防治DN的作用。本项目首先分别应用Beclin 1 siRNA和p300 siRNA预处理小鼠肾小球系膜细胞，并给予C66干预，在HG环境下培养，明确自噬蛋白Beclin 1介导的细胞自噬在C66预防系膜细胞损伤的作用，并研究p300对Beclin 1介导的细胞自噬的调节作用。然后，应用JNK基因敲除小鼠STZ诱导糖尿病模型，并给予C66灌胃，探讨JNK通路对p300及细胞自噬的调节在C66防治DN中的作用。通过本课题研究，我们得到以下结果：1）姜黄素衍生物C66能有效改善糖尿病诱导的肾脏功能、肾脏结构病理损伤，并在一定程度上减少肾脏炎性细胞浸润和改善肾脏纤维化，这种作用独立于糖尿病小鼠的血糖水平。并且C66是通过抑制jnk1来起到缓解糖尿病肾脏功能、结构损伤及减少肾脏炎症和纤维化。2）糖尿病早期可诱导肾脏自噬活动的增强，JNK信号通路的激活对于自噬活动具有抑制作用；C66能够在一定程度上，降低jnk1的表达水平，从而减少JNK信号通路对糖尿病肾脏自噬活动的抑制。3）C66可以降低PI3K/mTOR信号通路的蛋白磷酸化水平，减少其对糖尿病自噬活动的抑制，保护糖尿病肾脏。我们的研究结果将为临床上针对DM肾脏并发症寻找新的治疗方向和早期诊断指标提供理论依据。