植物可诱导性芪合成酶基因用于植病广谱抗性的研究

采用RT-PCR方法从两个不同品种葡萄组织总RNA中分别克隆了芪合酶基因。与国外报道的相比其核苷酸序列同源性分别为93%和95%，推导的氨基酸序列同源性为98%。这两个芪合酶基因之间的核苷酸序列同源性为92.5%，推导的氨基酸序列同源性为98%。其基因的大肠杆菌表达克隆特异地表达了42kD的蛋白（与芪合酶大小一致），并制备了该酶的兔抗血清。构建了能在植物中组成性表达的芪合酶结构基因的重组质粒，经农杆菌介导，获得转基因的PCR阳性烟草，经Western blot分析对有芪合酶特异蛋白表达的转基因烟草进行了抗灰葡萄孢的试验。离体叶组织在人工接种灰葡萄孢的菌丝悬浮液后，转基因烟草叶组织大部分呈绿色。与对照组相比显现转芪合酶基因烟草具有抗灰葡萄孢的能力。