TLR9激动剂通过枯否细胞与NK细胞crosstalk抑制疟原虫红外期感染的研究

疟疾是世界上危害严重的重要传染性疾病之一，探讨宿主抗红外期疟原虫天然免疫机制可为疟疾防治策略提供理论基础。按蚊叮刺、注入子孢子造成人体感染，如何有效、尽快启动天然免疫是阻断红外期发育重要的环节。本项目在前期研究的基础上，通过体内外实验分别特异性耗竭NK或枯否细胞(KC)后，采用定量PCR、流式细胞术和激光共聚焦等方法观察TLR9激动剂CpG是否通过肝脏NK/KC细胞交互作用(crosstalk)抑制红外期疟原虫的发育。TLR9受体的活化诱导KC/NK细胞交互作用，在IFN-γ和NO等抗疟原虫关键效应因子的作用下，在肝内诱导产生强大的旁观者杀伤效应，既能杀伤入侵的疟原虫子孢子，也能杀伤子孢子感染的肝细胞，从而抑制红外期疟原虫的发育，这为疟疾免疫防治、特别是阻断子孢子的侵入、红外期发育提供新的思路。这不但可推动天然免疫抗红外期疟原虫理论，而且为我们从天然免疫新视角开发疟疾免疫制剂提供理论基础。

探讨宿主抗红外期疟原虫天然免疫机制可为疟疾防治策略提供理论基础。前期的研究发现TLR信号通路参与了疟原虫红外期的免疫调节，通过CpG活化TLR9，发现提前活化TLR9信号通路能有效抑制红外期疟原虫的发育。本项目在前期研究的基础上，通过体内实验特异性耗竭NK细胞后，发现在肝脏NK细胞耗竭后，小鼠肝脏虫荷与仅给予CpG组相比明显增加。说明NK细胞参与了CpG介导的对红外期疟原虫的发育的抑制作用。同时，通过流式细胞分析发现，IFN-γ+淋巴细胞在TLR9活化小鼠表达明显升高，这一现象表明IFN-γ是TLR9活化后重要的效应分子。本研究证实了TLR受体介导的天然免疫对肝期疟原虫的杀伤作用，同时也发现NK细胞在此过程中的重要作用。这不但可推动天然免疫抗红外期疟原虫理论，而且为我们从天然免疫新视角开发疟疾免疫制剂提供理论基础。