EIF3H调控致癌蛋白的积累促进肝癌的发生发展研究

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the common malignant tumor and cause of cancer-related death, it is important to understand the molecular mechanisms that contribute to tumor initiation or progression of liver cancer. Through whole gene expression microarray detection of HCC samples and cell lines, we found eukaryotic translation initiation factor 3H (EIF3H) was highly expressed in HCC. In our project here, first we will knockdown the expression of EIF3H through siRNA to study whether endogenesis EIF3H play important roles on liver cancer cells proliferation, cell cycle and apoptosis; then we will confirm the relation between expression of EIF3H and clinical pathology in liver cancer. At the same time, we will further study the function of EIF3H using animal models and various cell function assays. To investigate the mechanism, we will define the downstream target genes of EIF3H through special protein synthesis detection and mRNA transcription detection, especially we will focus on how EIF3H regulate the cancer-relatived gene. We hope this study could lay a foundation for HCC diagnosis, prognosis, and therapy.

通过对原发性肝细胞癌样本全基因表达谱芯片的检测分析，以及对肝癌肿瘤细胞系的检测，我们发现基因真核生物翻译起始因子3H(EIF3H)在肝癌样本中高表达。本项目拟在肝癌细胞上通过RNA干扰技术，研究内源性EIF3H对肿瘤增殖，周期，凋亡等影响，初步确认EIF3H的基因功能，通过免疫组化在大样本上，确认EIF3H的表达和肝癌肿瘤临床及病理的相关性。同时计划通过深入的动物实验，多细胞的功能验证，以及EIF3H过表达后的功能研究，使得其功能更加明确。在机制方面，拟通过特定下游基因的蛋白合成速度和微弱mRNA的翻译效率的检测，明确被其调控的下游基因，特别是肿瘤功能相关基因的表达变化以及EIF3H的调控机制。希望通过本项目，对寻找肝癌诊断及预后判断指标和干预靶点奠定基础。

原发性肝细胞癌是世界上发病最普遍的实体肿瘤之一，每年新发病人至少一百万，并且发病数还在持续上升，它具有晚发病，进展快速和对治疗的应答有限的特点。在中国和世界上其他地方HCC 也是肿瘤相关性死亡的第二大常见原因。HCC 往往是在疾病自然病程的晚期才出现，许多病人由于疾病早期缺乏明显的症状而错过了最佳的治疗时机。尽管世界范围内对肝癌的研究已经持续了几十年，但由于不同的危险因素通过不同的分子途径，使HCC 的发病机制至今难以阐述清楚。. 通过对临床系统收集的肝癌样本进行表达芯片检测,对芯片数据深入检测分析发现,在肝癌组织中,相对于癌旁对照组织,EIF3H 基因在mRNA水平上的表达明显上调的趋势。人EIF3H基因位于染色体8q23.3部位，编码的蛋白p40亚基参与真核生物翻译起始因子3(Eukaryotic translation initiation factor 3, EIF3)的构成。EIF3是一种多蛋白复合体，在蛋白质翻译起始阶段起关键调控作用。 . 通过免疫组化及免疫印迹实验检测发现肝癌组织中EIF3H在蛋白水平相比较癌旁正常组织表达显著上调。进一步我们通过针对EIF3H的表达与病人预后随访资料以及相关临床信息进行关联性分析发现，肝癌组织中的EIF3H高表达可作为影响肝癌病人预后的独立风险因素。继而，为了探究EIF3H基因在肝癌发生发展过程中的作用，我们构建了两株配对的干扰工具细胞系，通过体内体外实验我们发现EIF3h基因表达影响肝癌细胞株的增殖， 并且我们通过表达谱芯片及蛋白水平研究发现，EIF3h基因可以影响p53信号通路以及通过影响Akt的磷酸化进一步影响mTOR通路的激活继而影响肿瘤细胞的增殖特性。. 基于背景和前期发现，我们认为EIF3H参与促进肝癌的发生发展过程，初步确认EIF3H的基因功能，并通过在大样本临床队列，确认EIF3H的表达和肝癌肿瘤临床及预后的相关性。我们的研究结果希望通过本课题，对寻找肝癌诊断及预后判断指标和干预靶点奠定基础。