靶向酰基载体蛋白的新型抗洋葱伯克霍尔德菌复合体药物筛选研究

洋葱伯克霍尔德菌复合体（Bcc）是一组条件致病菌，其高毒力、对临床常用抗生素的多重耐药以及耐药不均匀性是院内感染的主要威胁之一，现行的治疗方案对其彻底根除难以达到理想效果。因此，迫切需要针对新的抗菌靶点，构建新的筛选模型，获得不同于现有抗菌药物作用机制的新型药物。根据最新科学研究成果及本实验室的工作基础,我们选择酰基载体蛋白（ACP）为抗Bcc新靶标，将遗传背景清晰的大肠埃希氏杆菌作为模式菌，通过反义RNA沉默技术特异性抑制菌体中的ACP表达，建立超敏细菌高通量药物筛选模型，利用我国丰富的微生物资源，从微生物的代谢产物中定向筛选靶向Bcc的新型抗菌化合物，以期获得具有高选择毒性、高灵敏度、能够应对所有致病伯克霍尔德菌、且具有全细胞抑制能力的新型抗Bcc药物或先导化合物。

洋葱伯克霍尔德菌复合体（Bcc）是一组高毒力的条件致病菌，本项目以寻找靶向酰基载体蛋白（ACP）的抗洋葱伯克霍尔德菌（Bcc）化合物为目的，选择与Bcc的ACP同源性很高的大肠埃希氏杆菌作为模式菌，利用反义RNA沉默技术特异性降低靶基因acpP的表达水平，构建反义工程菌株，并基于该菌株构建了高通量靶向抗菌筛选模型。将所建模型用于5847份微生物发酵样品初筛，获得了566份阳性样品。总阳性率为9.68%。其中一株活性较强的HCCB 05714经分类研究，鉴定为刺盘孢属（Colletotrichum sp.）。从其代谢产物中分离纯化得到3个化合物，其中HCCB 05714-6-8-1为一新结构化合物，与另一化合物HCCB 05714-6-8-2为同分异构体，二者均为首次在刺盘孢属中分离得到的天然化合物，且具有ACP靶点活性。体外抗菌实验表明，这两个化合物也具有一定的抗洋葱伯克霍尔德菌活性。进一步拓展将反义RNA技术用于其余71个靶位的反义工程菌的构建，并对这些菌株进行了药物敏感性分析，可发现一些抗菌化合物的潜在协同或直接作用靶点。在国内核心期刊上发表三篇论文，国内学术会议发表三篇论文，一篇SCI论文和一篇中文核心期刊论文已投稿，并在2012年和2014年上海市药学会青年学术论坛上分别获得二等奖和一等奖。