vinexin β在血管损伤后新生内膜增生中的作用及其机制

Vinexin β, a novel ubiquitously expressed adaptor protein, has been implicated in cell adhesion, cytoskeleton organization and growth factor signal transduction. However, the role of vinexin β in neointima formation remains unclear. The proposed research consists of three parts to clarify the role and mechanism of vinexin β in neointima formation at cell, animal and molecular levels. In the first part, the vinexinβknockout and vascular smooth muscle specific transgenic mice will be used to study the effect of vinexin β on neointima hyperplasia after carotid wire injury. In the second part, to clarify the role of vinexin β in proliferation and migration of vascular smooth muscle cell, the primary vascular smooth muscle cell from vinexin β knockout and vascular smooth muscle specific transgenic mice will be isolated and treated with platelet derived growth factor(PDGF-BB). In the third part, Advinexin β and Adshvinexin β adenoviruses will be used to infect primary rat vascular smooth muscle cell to get overexpression or downregulation of vinexin β, and the molecular mechanism of vinexin β will be investigated. We try to clarify the role and mechanism of vinexin β in neointima formation and provide new molecular target for prevention and therapy of neointima formation.

Vinexinβ是参与调节细胞粘附，细胞骨架组合以及生长因子信号转导的衔接蛋白。目前国内外关于vinexinβ对血管内膜新生的作用及其机理的研究尚无相关报道。本项目拟从动物，细胞和分子水平系统阐明vinexinβ在新生内膜增生中的作用及其机制。第一部分，运用vinenexinβ基因敲除和血管平滑肌特异性转基因小鼠建立颈动脉导丝损伤模型，研究vinexinβ对血管新生内膜增生的影响。第二部分，分离培养vinexin β基因敲除和血管平滑肌特异性转基因小鼠和野生型小鼠血管平滑肌细胞，研究vinexin β对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响。第三部分，在大鼠血管平滑肌细胞中通过RNA干扰和过表达载体抑制或上调vinexinβ的表达，探讨vinexinβ作用的可能的分子机制。力图明确vinexinβ在内膜新生中的作用及其对平滑肌细胞增殖、迁移作用的根本机制，为内膜新生相关疾病的防治提供新的分子靶点。

vinexin β是衔接蛋白家族的新成员，在调控细胞粘附，细胞骨架重构，细胞信号转导和基因转录方面发挥重要作用。但vinexin β在血管疾病中的确切作用仍有待阐明。.本项目最初的目的是研究vinexin β在血管损伤后新生内膜增生中的作用，然而在延长观察时间和重复实验后，我们发现研究并没有获得预期的理想结果，在排除了实验方法和实验条件的干扰后，我们决定改变实验内容。变更后的项目旨在研究vinexin β在动脉粥样硬化形成中的作用和潜在的发病机制。首先我们检测了动脉粥样硬化斑块中vinexin β的表达，结果显示不管是冠心病患者的冠状动脉粥样硬化斑块还是高脂饮食的apolipoprotein E-/- 小鼠动脉粥样硬化斑块，vinexin β表达都较正常血管增加。随后我们评估了vinexin β敲除对动脉粥样硬化形成的影响。高脂饮食的 vinexin β-/- apolipoprotein E-/- 小鼠动脉粥样硬化斑块与 apolipoprotein E-/- 小鼠相比明显减少，斑块中巨噬细胞数量更少，斑块的性质更加稳定，表现为脂质聚集减少，平滑肌细胞和胶原含量增加。此外，骨髓移植实验证实主要是造血细胞来源的 vinexin β敲除抑制动脉粥样硬化。与这些结果一致的是， vinexin β-/- apolipoprotein E-/- 小鼠促炎介质表达减少，而抗炎的M2巨噬细胞标志物上调。免疫组化和体外细胞实验显示 vinexin β缺失导致单核细胞聚集减少，TNF- α刺激的巨噬细胞迁移收到抑制。最后在机制研究中，我们发现在结构性活化Akt后，vinexin β缺失对于泡沫细胞形成，NF- κB 活化和炎症细胞因子表达的抑制效应被显著逆转。而过表达vinexin β所导致的NF-κB活化可以被Akt抑制拮抗。.总的来说，研究结果首次发现vinexin β缺失减轻动脉粥样硬化，这个作用主要通过抑制血管炎症，失活Akt- NF-κB信号通路。我们的研究结果提示vinexin β可能作为动脉粥样硬化治疗的靶点。