甲基化介导Hp沉默miRNA靶向调控胃癌细胞中B7-H1表达的机制

研究证明：B7-H1在胃癌细胞中高表达并介导肿瘤免疫逃逸。近年来发现：B7-H1是受转录后调控的蛋白，miRNA以转录后调控的方式抑制肿瘤的发生发展。本项目预实验初步证实：胃癌细胞中B7-H1的表达受到miRNA的控制，而这些miRNA的启动子可能处于甲基化状态。另一方面，幽门螺杆菌（Hp)感染已被明是引起甲基化的重要因素。而启动子甲基化状态能沉默miRNA。因此，本项目结合目前研究进展及预实验结果推测：Hp感染激活了甲基化转移酶(DNMT)而致miRNA启动子区域甲基化，造成miRNA沉默，从而失去对B7-H1的控制，促进胃癌细胞中B7-H1的表达，最终介导胃癌免疫逃逸。本项目若能证实"Hp感染-激活DNMT-启动子甲基化-miRNA沉默-B7-H1高表达"这条轴的存在，则将解释Hp致miRNA甲基化并靶向调控B7-H1表达和胃癌细胞免疫逃逸的分子机制，为研发相应的治疗方案奠定理论基础。

免疫逃逸是恶性肿瘤的标志性特征之一。B7同源物1（B7 homolog 1，B7-H1）作为近年来发现的T细胞免疫共刺激分子之一，初步被证明在胃癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤组织中较正常组织表达上调，发挥对肿瘤免疫的抑制作用，促进肿瘤发展。然而B7-H1上调的具体机制并不清楚。微小RNA（micro-RNAs）是细胞蛋白质水平转录后调控的广泛途径，本课题组通过比较B7-H1阳性和阴性胃癌细胞的micro-RNA表达谱差异，筛选出并证实了miR-152和miR-200b可通过结合B7-H1 mRNA3’端未翻译区下调B7-H1表达。miR-152和miR-200b的表达又受到去甲基化药物的调节，提示基因甲基化水平的改变可通过micro-RNA影响B7-H1表达。幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）是胃癌重要的致癌因素，而且幽门螺杆菌感染已被证明可影响基因甲基化水平。本课题组证实，Hp能刺激胃癌细胞表达高迁移率组分蛋白1（high mobolity group protein 1, HMGB1），进而提高miR-152和miR-200b基因甲基化水平，降低miR-152和miR-200b的表达及对B7-H1表达的抑制作用，最终上调B7-H1的表达。Hp感染—HMGB1—启动子甲基化—micro-RNA表达水平下降—B7-H1表达上升这一轴线可能是胃癌B7-H1表达上调和免疫逃逸的重要机制。