南天竹子对抗肿瘤药三氧化二砷减毒的物质基础及作用机制研究

三氧化二砷(As2O3)是传统中药砒霜中的主要成分，现代药理学和分子生物学证明了As2O3治疗肿瘤的有效性并具有广谱抗癌作用,尤其在治疗急性早幼粒细胞性白血病（APL）更是取得满意的疗效。目前临床上用于治疗APL的亚砷酸注射液为FDA第一个批准上市的中药抗白血病药物。但因As2O3具有肝、心脏与肾毒性等副作用，在多数国家只是作为二线用药，毒副作用大大限制了其临床应用。我们前期研究表明南天竹子提取物对抗肿瘤药物As2O3具有减毒持效的作用。本项目，（1）从减毒和持效两个指标筛选南天竹子提取物中活性成分，阐明南天竹子拮抗As2O3毒性的物质基础；（2）从防止器官功能损伤和影响体内药物代谢及代谢酶的活性两个角度研究南天竹子有效成分拮抗As2O3毒性的作用机制。通过本项目的研究，为提高As2O3和含As2O3及与其毒性类似的药物临床应用的安全性及进一步研发南天竹子与As2O3的复方新药奠定基础。

本项目按照计划任务书执行，执行情况如下：.1、完成了南天竹子生物碱及非生物碱各极性部位制备、初筛及有效部位的确定：生物碱部位为南天竹提取物对三氧化二砷所致心肌毒性的解毒有效部位；酚酸部位为南天竹子提取物对三氧化二砷所致肝、肾毒性的解毒有效部位。.2、有效部位化学成分的分离与鉴定：共分离到43个单体化合物，鉴定出38个化合物，其中从总生物碱部位共分离20 个化合物；从总酚酸部位中共分离了23 个化合物。1 个新的生物碱，29 个为首次从该植物中分离得到。.3、药效物质基础的确定：选择量大且具代表的单体化合物，生物碱类如小檗碱、南天竹宁碱，木脂素如丁香素、松脂素，酚酸类岩白菜素、没食子酸分别与三氧化二砷配伍进行减毒药效研究。通过单体化合物减毒效果与总生物碱、总酚酸及总提取物的减毒效果进行对比，结果显示，部分单体化合物作用略低于化学部位，而单体化合物和化学部位明显低于总提取物的作用效果，提示南天竹中酚酸和生物碱组分是南天竹拮抗三氧化二砷毒性的化学物质基础，其作用可能是通过协同作用拮抗毒性，具有多靶点、多途径中医药特点。但是，南天竹抗As2O3毒性的药效活性组分需进一步明确，有效成分组合间的量效关系尚需进一步研究。.4、作用机制初步研究：测定小鼠体内各个脏器中AS2O3的含量，实验结果显示AS2O3及AS2O3联合生物碱有效部位、酚酸有效部位和总提取物在小鼠体内的分布情况存在差异，总提取物与三氧化二砷配伍在肾脏、心脏分布明显减少，生物碱有效部位配伍心脏分布减少，而酚酸有效部位配伍肾脏上分布改变更为显著，三种配伍对肝脏分布影响不明显，但三者均毛发的分布增加，提示南天竹可能改变三氧化二砷在小鼠体内的分布，但其具体机制尚需进一步实验。另外，南天竹提取物、化学部位和单体与三氧化二砷联合给药能减少了QTc延长趋势，能提高大鼠血清中的SOD、GSH-Px、CAT等水平；降低MDA、尿素氮、MDA 等水平。通过肝脏P450氧化同工酶的代谢性相互作用试验表明大鼠肝微粒体中CYP450 的质量摩尔水平下降，提示南天竹子对三氧化二砷减毒可能是通过对三氧化二砷增强或诱导CYP450酶活力产生抑制作用。.5、本课题在研期取得发明专利授权1 项；公开发表论文7 篇，其中SCI 收录期刊2 篇，4 篇国内核心期刊收录，1篇为一般期刊收录。另外3篇文章正处数据处理、撰写和投稿阶段。