CDNF对蛋白酶体抑制诱导多巴胺能神经元变性的作用及其机制研究

帕金森病(PD)是一种常见神经变性疾病，其病理特征为中脑黑质多巴胺（DA）能神经元进行性变性和残存神经元中Lewy小体形成。目前治疗仅针对症状而达不到根治，从病理源头阻断并逆转DA能神经元变性成为治愈PD焦点。研究表明，CDNF作为新型保守性DA能神经元营养因子，对DA能神经元变性具有显著保护和逆转作用，其机制目前尚不清楚。本研究利用蛋白酶体抑制剂诱导PD细胞模型，体外检测CDNF对DA能神经元变性的保护和逆转作用以及对蛋白酶体功能的维护和修复作用。利用蛋白酶体抑制剂建立PD动物模型，观察CDNF对实验大鼠行为、病理学以及蛋白酶体功能活性的保护和逆转作用。体内外研究CDNF是否通过维护和修复蛋白酶体功能活性来阻断和逆转DA能神经元变性，探索"CDNF－维护和修复蛋白酶体系统－保护和逆转DA能神经元"新型神经保护机制，阐明蛋白酶体系统功能活性在CDNF保护和逆转DA能神经元变性机制中的作用。

帕金森病(PD)因中脑黑质多巴胺(DA)能神经元选择性进行性变性而导致临床症状的产生，从病理源头阻断并逆转其变性成为研究的热点。CDNF已在6-OHDA大鼠模型上证实其对大鼠中脑DA能神经元具有保护和逆转作用，但其机制目前尚不清楚。作为DA能神经元变性机制而言，泛素-蛋白酶体系统受损导致的蛋白水解应激被誉为PD发病的共同通路。本项目利用蛋白酶体抑制剂诱导PD细胞及动物模型，通过在模型诱导前后施加CDNF蛋白进行干预，研究结果显示CDNF蛋白对蛋白酶体抑制剂（Lactacystin/MG132）诱导的DA能神经元变性具有保护和逆转作用，而且两种不同蛋白酶体抑制剂的保护和逆转作用无统计学差异。进一步就其作用机制研究显示，CDNF对Lactacystin和MG132诱导的26s蛋白酶体具有保护作用，而且MG132与Lactacystin相比具统计学差异；然而CDNF仅对MG132诱导的26s蛋白酶体具有逆转作用，而CDNF对Lactacystin所诱导的26s蛋白酶体逆转作用无统计学意义。对蛋白酶体三种水解酶作用研究显示，CDNF对MG132与Lactacystin诱导的谷氨酰肽水解酶均有保护作用，而且这种作用无统计学差异；同时CDNF对谷氨酰肽水解酶均有逆转作用，而且MG132比Lactacystin具有统计学意义。就其糜蛋白酶及胰蛋白酶而言，CDNF仅对MG132诱导的糜蛋白酶有保护作用，而对其没有观察到其他具有统计学意义的保护及逆转作用。所以，本项目实验证实“CDNF-维护和修复蛋白酶体系统-保护和逆转DA能神经元”的新型神经作用机制，但就其对蛋白酶体内部作用靶点而言水解酶仅仅是其作用一部分而已，具体作用靶点及机制仍需进一步探索。