用基因工程技术构建卵巢癌单克隆抗体ＶH基因的研究

为克服鼠源单抗在卵巢癌导向诊断和治疗中存在的肿瘤组织摄取困难，异源性大等问题，本室利用分子生物学及遗传工程技术制备了鼠抗卵巢癌单克隆抗体COC183-B2重链可变区（VH）片段。首先从分泌该单抗的杂交瘤细胞株中提取mRNA，用小鼠免疫球蛋白重链可变区通用引物，经反转录-PCR扩增VH基因，测定其序列，分析表明：该VH基因为鼠抗体功能性可变区基因。将其克隆入表达载体PFUW80，转化相应的受体菌XL1-Blue表达，表达产物经ELISA检测，证实其可与相应的卵巢癌抗原发生特异性结合。该抗体VH片段，分子小，易进行肿瘤实质，且保留了抗体的亲和性和特异性，降低了异源性，更适于作为导向诊断和治疗的载体。并为单链抗体制备奠定基础。