后处理对颈动脉重度狭窄术后再灌注性脑损伤的保护作用

颈动脉狭窄是神经外科的常见病，其治疗策略是解除狭窄重建脑血流。但是对于颈动脉重度狭窄患者，血管及血流重建后过度灌注导致的脑损伤是影响术后疗效的主要问题，目前尚缺乏有效的预防和治疗措施。后处理已经被证实具有保护急性缺血后再灌注性脑损伤的作用，但是对颈动脉重度狭窄所致慢性缺血后再灌注性脑损伤的作用尚不清楚。我们采用针控线拴法建立了颈动脉重度狭窄脑低灌流大鼠模型，初步证实后处理具有保护血管及血流重建后再灌注性脑损伤作用，因此在预实验的基础上我们拟从以下方面对后处理的保护作用及机制进行深入研究：1后处理对再灌注后动脉血压、颈动脉血流及脑血流变化的影响；2后处理对脑组织水肿的影响及机制；3后处理对血脑屏障通透性的影响及机制；4后处理对神经元死亡的影响及机制。为后处理在临床上的应用提供理论依据。

颈动脉狭窄是神经外科的常见病，其治疗策略是解除狭窄重建脑血流。但是对于颈动脉重度狭窄患者，血管及血流重建后过度灌注导致的脑损伤是影响术后疗效的主要问题。虽然缺血后处理已经被证实具有保护缺血后再灌注性脑损伤的作用，但是对解除颈动脉重度狭窄所致再灌注性脑损伤的作用尚不清楚，而且缺血后处理的脑保护作用还有待深入研究。在本研究中，我们采用针控线拴法建立了颈动脉重度狭窄脑低灌流大鼠模型，采用脑血流检测、免疫组化、ELISA、蛋白印迹分析等方法探讨了缺血后处理对解除颈动脉重度狭窄后所导致的脑血流、脑损伤、脑水肿及血脑屏障等的影响。缺血后处理方法为：采用动脉瘤夹夹闭双侧颈动脉30秒后解除动脉瘤夹恢复脑血流30秒，如此反复三个循环。我们发现，1、采用针控线拴法可以有效地制作大鼠双侧颈动脉重度狭窄模型。颈动脉狭窄可以导致大鼠脑血流显著下降，其后脑血流缓慢增加直至第6天开始进入平台期。同狭窄组相比较，颈动脉狭窄三天后解除狭窄，脑血流得到显著改善，但是仍然低于假手术组的水平。在解除狭窄的同时给予缺血后处理能够进一步提高脑血流，但是同狭窄组相比较未见显著改善；2、缺血后处理具有保护解除颈动脉狭窄后所致的海马CA1区神经元损伤的作用。这种保护作用不仅与缺血后处理能够显著降低海马CA1区神经元内的氧化应激反应产物MDA和8-iso-PGF2α、提高抗氧化酶SOD及CAT活性有关，而且还与缺血后处理能够显著降低炎症反应因子IL-1 β和TNF-α的表达有密切关系。3、缺血后处理具有降低解除颈动脉狭窄后导致的脑水肿及保护血脑屏障的作用。同解除颈动脉狭窄组相比较，缺血后处理能够显著减少脑组织的含水量、降低血脑屏障的通透性；这种作用与其能够抑制MMP-9的活性及表达以及提高紧密连接蛋白Claudin-5和Occludin的表达有密切关系。4、缺血后处理保护全脑缺血再灌注后神经元损伤的作用与降低短暂脑缺血再灌注后蛋白聚集有密切关系。而且，这种降低蛋白聚集作用与缺血后处理能够改善蛋白酶体的活性及亚基蛋白的表达，降低蛋白质氧化应激产物羰基化合物的含量，提高蛋白伴侣hsp7和hsp40的表达有密切关系。5、缺血后处理保护局灶脑缺血后脑损伤与其能够降低与线粒体相关的氧化应激反应以及维持线粒体的功能有密切关系。以上研究结果表明，缺血后处理是一种有效地能够抑制再灌注性脑损伤的方法，特别是对解除颈动脉狭窄后的再灌注性