基于炎癌转化机理的当归汤用于结直肠癌预防的有效物质确认与多元给药系统构建

Blocking 'inflammation malignant transformation' is the key point to the colorectal cancer (CRC) prevention. Traditional Chinese Medicine (TCM) has advantages in chronic colitis providing important resources for the development of colorectal cancer prevention agents. On the basis of connection of TCM treatment principle and chemo-preventive theory, the effective substances in Dang-Gui decoction (DGD) will be identified and enriched. The evaluation system of DGD extract will be established based on 'substance'-'Zheng'-'effect' correlation through chemical and bioactive characterization. According to biopharmaceutical properties, multi-unit pellets system will be prepared. Compared with DGD on AOM/DSS model, more effective and stable TCM compound preparation can be prepared for CRC prevention.CRC preventive mechanism of DGD will be comprehensively revealed by corresponding relationship of 'WenZhong – anti-oxidation and anti-inflammation', 'BuXue-iron metabolism', 'HeXue-Hemoheological properties', 'BuPiXu-NKC immunoregulation'. We put forward CRC preventive agent screening research ideas in line with international standards and characterization, preparation, and evaluation methods for classical TCM prescription development.

阻断“炎-癌转化”是预防结直肠癌发生发展的关键，而中医药在治疗慢性结肠炎方面具有独特优势，是研制结直肠癌预防药物的重要资源。本课题拟以当归汤为研究对象，在前期研究基础上，结合中医治则和现代癌症预防机理，确认并富集方中有效物质，并通过对提取物化学成分及多指标生物学活性的表征，建立基于“方”-“证”-“效”相关的提取物质量评价体系；依据不同有效物质的生物药剂学性质，构建多单元微丸系统，在AOM/DSS结直肠癌模型上，通过与当归汤剂比较，制备并验证更加优效、稳定的用于结直肠癌预防的中药复方制剂；并以当归汤的中医功效对应现代生物学研究，从“温中-抑炎抗氧化”、“补血-铁代谢调控”、“和血-血液流变学改善”、“补脾虚-NKC免疫调控”的角度全面阐释当归汤炎症相关癌症预防的作用机理。本课题为从中药经典方中筛选癌症预防药物提供与国际接轨的研究思路和可行的提取物表征、成型及质量评价方法。

本课题旨在提取富集当归汤中具有炎症相关结直肠癌预防潜力的有效物质，并将其制备成为预防炎症相关结直肠癌的现代中药复方制剂。根据前期研究基础和文献调查结果，设计并优化了当归汤超临界提取物和多糖类提取物的制备工艺参数，并采用GC/MS等对提取物化学成分进行表征，从当归汤超临界提取物中定性鉴别出Z-藁本内酯等34个成分，当归汤多糖类提取物主要由葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖组成。其次，阻断“炎-癌转化”是预防结直肠癌发生发展的关键，结合当归汤功效与现代中药药理研究成果，采用体内外药理学研究方法，选择抗炎抗氧化指标、铁代谢调节指标和免疫调节指标对提取物的生物活性进行表征，综合评价提取物用于炎症相关结直肠癌的预防潜力。结果显示，当归汤超临界提取物显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞生成NO，体外抗炎活性良好，当归汤多糖类提取物没有表现出明显的体外抗炎活性，但是体现出良好的免疫调节作用；在TNBS诱导的大鼠炎症性肠病模型上，当归汤超临界提取物和多糖类提取物均能够降低疾病活动指数，缓解结直肠损伤，改善生存质量。超临界提取物发挥抗炎、抗氧化与调节铁代谢作用，反映当归汤“温中”与“补血”功效，多糖类提取物侧重于调节机体免疫，更多地反映“补脾”功效，二者具备预防炎症相关结直肠癌的潜力。然后根据当归汤超临界提取物和多糖类提取物的化学组成和生物活性不同，设计并制备多单元微丸系统，当归汤超临界提取物结肠靶向微丸的体内结肠靶向性良好，当归汤多糖类提取物微丸能够实现胃部释放。最后，采用DMH/DSS诱导的大鼠炎症相关结直肠癌模型，考察当归汤多单元微丸系统对炎症相关结直肠癌的化学预防作用，与当归汤原方汤剂、提取物组合以及单一微丸制剂进行比较，验证了多单元微丸系统剂型设计的优势。本研究为以“方”-“证”-“效”相结合原则为指导进行中药复方有效物质研究提供可参考的思路和方法，为以病症为导向的现代中药复方制剂研发模式提供实验依据。