健脾解毒方介导PTEN/PI3K/AKT调控血管新生抑制幽门螺杆菌诱发小鼠胃癌的研究

Helicobacter pylori（H. pylori）infection correlates to the genesis and development of the gastric cancer, and angiogenesis plays an important role in this project. How to inhibit angiogenesis becomes a research hotspot at home and abroad.In a previous study, we found that Chinese herbal compound, which was based on traditional Chinese medicine（TCM） method of invigorating spleen and detoxification, could reduce the incidence of C57BL/6 mouse gastric cancer induced with H.pylori long-term infection. The important mechanisms is to decrease microvessel density(MVD) in gastric mucosa of C57BL/6 mice and inhibit vascular endothelial growth factor(VEGF) expression, but the mechanisms is not clear precisely. PTEN/PI3K/AKT signaling pathway is an important way of regulation of angiogenesis. At the base of former research, in this study we investigate the mechanisms of Jianpi Jiedu Recipe on inhibiting VEGF expression and angiogenesis and reducing the incidence of C57BL/6 mouse gastric cancer induced with H.pylori infection via PTEN/PI3K/AKT signaling pathway，therefore make clear the Jianpi Jiedu Recipe action target of prevention and treatment of gastric cancer. To perfect the treatment method of TCM on H. pylori infection，to clarify the mdern and scientific connotation of TCM method of invigorating spleen and detoxification, and to provide the experimental and theoretical basis for its clinical application.

幽门螺杆菌(H. pylori)感染与胃癌发生发展密切相关，血管新生在其中发挥了重要作用，如何抑制血管新生成为国内外研究的热点。我们前期研究发现，以中医健脾解毒法组方的中药复方可降低H. pylori长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌发生率，减少小鼠胃粘膜微血管密度（MVD）、抑制血管内皮生长因子（VEGF）表达是其重要机制，但确切机理尚不清楚。PTEN/PI3K/AKT信号通路是调控血管新生的重要途径。本研究在前期研究基础上，探讨健脾解毒复方调控PTEN/PI3K/AKT信号通路抑制VEGF表达和血管新生，降低H. pylori感染诱发C57BL/6小鼠胃癌的机制，明确该方防治胃癌的作用靶点。丰富中医关于H. pylori感染的治疗方法，阐明中医健脾解毒治法的现代科学内涵，为其临床应用提供实验和理论依据。

背景：幽门螺杆菌(H. pylori)感染与胃癌发生发展密切相关，血管新生在其中发挥了重要作用，但其机制尚不清楚，如何抑制血管新生成为国内外研究的热点。.主要研究内容：本研究建立H. pylori长期感染诱发C57BL/6小鼠胃癌模型，并给予健脾解毒方低、高、中剂量干预，观察小鼠胃粘膜癌变率及MVD、VEGF、p-PTEN、PTEN、p-AKT、AKT蛋白表达的变化。观察PTEN/PI3K/AKT通路在H. pylori诱导的VEGF表达和血管内皮细胞管腔形成中的作用以及健脾解毒方的调控作用。.重要结果：1. H. pylori感染C57BL/6小鼠可诱发小鼠胃粘膜癌变，增加胃粘膜MVD和VEGF的表达，对PTEN、AKT蛋白的表达无影响，但可增加p-PTEN和p-AKT蛋白的表达，通过使PTEN失活，进而活化PI3K/AKT通路，在胃癌的发生发展中发挥作用。健脾解毒方可抑制H. pylori感染C57BL/6小鼠胃粘膜癌变，减少胃粘膜MVD和VEGF的表达。健脾解毒方对小鼠对胃粘膜PTEN、AKT蛋白表达无影响，但可减少p-PTEN和p-AKT蛋白的表达，说明健脾解毒方抑制MVD和VEGF可能的机制是通过调控PTEN/PI3K/Akt信号通路实现的。.2. H. pylori感染可诱导人胃癌MKN45细胞VEGF的表达和血管内皮细胞管腔形成。H. pylori感染对人胃癌MKN45细胞PTEN、AKT蛋白的表达无影响，但可增加p-PTEN和p-AKT蛋白的表达，通过使PTEN失活，进而活化PI3K/AKT通路；H. pylori可通过激活PTEN/PI3K/AKT诱导人胃癌MKN45细胞VEGF表达和血管内皮细胞管腔形成。健脾解毒方可抑制H. pylori感染诱导的人胃癌VEGF的表达和血管新生。健脾解毒方对H. pylori感染诱导的人胃癌MKN45细胞PTEN、AKT蛋白的表达无影响，但可减少p-PTEN和p-AKT蛋白的表达，对PTEN/PI3K/Akt信号通路进行调控从而抑制VEGF表达和血管新生。.科学意义：1.有助于从调控信号转导角度阐明健脾解毒方抑制血管新生、防治胃癌的作用靶点，为其临床应用提供可靠的实验依据；2.丰富中医关于H. pylori感染的治疗方法，阐明中医健脾解毒治法的现代科学内涵，为其临床应用提供实验和理论依据。