SIRT1调控免疫细胞功能的机制及其抑制剂的抗移植排斥作用研究

•.Recently the immunologists pay more attention to the epigenetic regulation which is thought to be the precise regulation mechanism of immune cells. Transplant scientists focus in the mechanism of epigenetic regulation of rejection, especially the effect of preventing chronic rejection. SIRT1, the Class Ⅲ histone deacetylase（HDAC）discovered recently, is considered to be strongly associated with rejection, but there is still no research about the role of SIRT1 plays in rejection. Previously, we found Sirtinol, the Class III HDAC inhibitor, can significantly prolong the allograft survival, and the inflammatory response in graft is very weak. Based on the inspiring observations, we are determined to further investigate the mechanism of SIRT1 regulate immune cells. We plan to use RNA interference to investigate how SIRT1 regulates the biological characteristics of immune cells and signal pathway, and compare the influence of SIRT1 inhibitor(Sirtinol) and CNIs(FK506) on the immune cells. We will compare Sirtinol and FK506 of anti-rejection effect by heart transplantation model in mice. We will focus on the result of Sirtinol prevents the chronic rejection, which is characteristic of microvascular inflammatory pathological changes and fibrosis. We hope our research can provide date to find a better way to prevent rejection.

免疫细胞表观调控被认为是免疫细胞精确调控的机制受到免疫学家重视。表观调控机制如何调控排斥反应并可否作为更有效控制排斥反应特别是慢性排斥的切入点受到移植学界关注。SIRT1是新发现的第Ⅲ类HDAC，可能与免疫细胞调控密切相关，但是否在排斥反应中发挥重要作用尚无研究。前期实验发现第Ⅲ类HDAC抑制剂Sirtinol可显著延长移植物存活，且观察到移植物少有炎症反应。基于此，本课题拟研究SIRT1调控免疫细胞的机制及其在抗移植排斥中的作用。采用RNA干扰研究SIRT1调控免疫细胞的生物特性及功能的分子机制，并比较其抑制剂与CNI抑制剂调控免疫细胞的不同作用机制；采用心脏移植模型研究Sirtinol的抗排作用与CNI的不同特点与效果，探讨与小剂量FK联合在作用机制互补后的抗排效果；采用慢排模型，重点研究Sirtinol以微血管炎症及纤维化为特征的慢排防治效果，为发现新的免疫抑制方法提供数据。

免疫细胞表观调控被认为是免疫细胞精确调控的机制受到免疫学家重视。表观调控机制如何调控排斥反应并可否作为更有效控制排斥反应特别是慢性排斥的切入点受到移植学界关注。Sirt1是新发现的第Ⅲ类HDAC，可能与免疫细胞调控密切相关，但是否在排斥反应中发挥重要作用尚无研究。前期实验发现第Ⅲ类HDAC抑制剂Sirtinol可显著延长移植物存活，且观察到移植物少有炎症反应。基于此，本课题拟研究SIRT1调控免疫细胞的机制及其在抗移植排斥中的作用。. 我们构建了MHC错配的小鼠颈部异位心脏移植模型，发现sirtinol可以抑制TH17细胞的分化，促进Treg细胞的分化，通过调节TH17和Treg之间的平衡发挥它的抗排斥作用，延长移植物的生存周期。另外，我们还发现sirtinol可以影响B细胞的增值分化，减少成熟B细胞数量，降低浆细胞分泌的抗体，减轻由B细胞介导的体液性排斥反应。因为sirtinol和CNI类药物对于抑制排斥有不同的作用机制，因此我们将二者联用，给予心脏移植小鼠并观察移植心脏的生存周期。结果发现sirtinol联合低剂量FK506相较正常剂量FK506可以有效延长移植心脏生存周期。我们还观察了sirtinol对慢性排斥反应的影响作用，结果发现sirtino能够有效的延长CAV模型中移植心脏的生存周期。这些研究结果表明Sirt1抑制剂sirtinol可以有效解决目前临床上免疫抑制药物长期服用导致的肝肾毒性、CNI类药物对于体液性排斥反应以及慢性排斥抑制力不足等问题，提示其具有十分广阔的临床应用前景。