鹰嘴豆异黄酮对炎症介导的多巴胺能神经元损伤的保护作用及机制研究

调控小胶质细胞，保护多巴胺能神经元是当前神经科学研究的热点之一。本项目拟以鹰嘴豆中一种主要的异黄酮――鸡豆黄素A为对象，利用脂多糖建立大鼠多巴胺能神经元损伤的帕金森病细胞模型，在不同时间点给予不同剂量鸡豆黄素A，通过对炎性因子及其相关酶(iNOS、COX-2、NADPH oxidase) (mRNA和蛋白水平)，雌激素受体(ER-α, ER-β)(mRNA和蛋白水平)，p38 MAPK、JNK和ERK蛋白，以及细胞核中NF-κB p65蛋白、NF-κB与DNA结合及转录活性进行检测，以研究鸡豆黄素A 对小胶质细胞活化介导的多巴胺能神经元损伤的保护作用及相关信号传导通路，并且探讨雌激素受体、MAPK、NF-κB所起的作用以及它们之间的关系。通过本项目的研究，不仅能从分子水平上阐明鸡豆黄素A对多巴胺能神经元保护作用的机制，而且为揭示鸡豆黄素A新的功能提供科学依据。

帕金森病是中老年人常见的中枢神经系统退变性疾病。帕金森病的主要病理特征为黑质致密部多巴胺能神经元进行性、选择性变性，导致纹状体多巴胺含量显著降低。近年来研究表明小胶质细胞参与帕金森病的发病和病情发展。小胶质细胞被激活后会释放出一些炎性物质，导致多巴胺能神经元发生变性甚至死亡。如何有效阻止或抑制小胶质细胞的活化，保护多巴胺能神经元则是当前神经科学研究的热点之一。.本项目以鹰嘴豆来源的一种主要异黄酮——鸡豆黄素A为对象，利用脂多糖诱导建立帕金森病细胞模型和动物模型以及利用MPP+诱导建立PC12细胞凋亡模型，给予不同剂量的鸡豆黄素A，通过检测炎性因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2）、NO和ROS及相关酶（iNOS、COX-2、NADPH oxidase）的mRNA和蛋白水平，检测信号通路分子p38 MAPK、JNK、ERK蛋白水平及其磷酸化水平，检测SOD、GPx活性和MDA水平以及P47phox、P67phox、gp91phox蛋白水平，检测NF-κB蛋白水平及其磷酸化水平，检测细胞凋亡蛋白cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9表达水平，从抑制小胶质细胞活化、MAPK信号转导通路、抗氧化应激、雌激素受体和抗凋亡等方面，体外和体内实验深入研究了鸡豆黄素A对多巴胺能神经元的保护作用及机制。研究结果表明：（1）鸡豆黄素A抑制LPS诱导的小胶质细胞的活化和促炎因子的生成以及相关酶蛋白表达，保护多巴胺能神经元；（2）鸡豆黄素A通过抑制MAPK信号转导通路从而抑制小胶质细胞活化和炎性因子生成，保护多巴胺能神经元；（3）Bioch A能够改善LPS诱导帕金森病大鼠的行为学变化和多巴胺能神经元的损伤，其机制可能是与抑制MAPK信号通路和NADPH氧化酶的激活有关；（4）鸡豆黄素A通过雌激素受体抑制小胶质细胞活化保护多巴胺能神经元；（5）鸡豆黄素A具有抑制PC12细胞凋亡的作用。.通过本项目的研究，不仅从分子水平上阐明了鸡豆黄素A对多巴胺能神经元保护作用的机制，而且为揭示鸡豆黄素A新的功能及其在帕金森病治疗上潜在应用价值提供了科学依据。