p-VASP S157在有丝分裂中的作用及机制

"血管扩张刺激磷蛋白"(VASP）主要参与微丝组装的调控，调节细胞粘附、变形、迁移等生物学行为。近来，我们发现丝氨酸157位点磷酸化的VASP（p-VASP S157）定位于纺锤体，且与微管蛋白共定位。据此，我们推测VASP可能是一种新的参与纺锤体形成的微管相关蛋白；进一步研究发现，p-VASP S157水平与细胞周期中G2/M期的进程相关，提示其与细胞有丝分裂密切相关。因此，本项目将对p-VASP S157在细胞有丝分裂中的作用及机制进行系统的研究：利用磷酸化位点突变技术，研究p-VASP S157在纺锤体形成和有丝分裂中的作用；用免疫共沉淀和微管聚合沉淀方法研究p-VASP S157与微管蛋白的相互作用；利用有丝分裂相关的多种蛋白激酶抑制剂，确定与有丝分裂相关的VASP磷酸化受到何种蛋白激酶的调控。研究结果将阐明p-VASP S157在有丝分裂中的作用和机制，揭示VASP蛋白的新功能。

摘要：本项目旨在研究丝氨酸157位点磷酸化的血管扩张刺激磷蛋白（p-VASP S157）在细胞有丝分裂中的作用，阐明其相关的作用机制。首先，研究发现p-VASP S157在肿瘤中过度磷酸化。随后，对p-VASP S157在细胞有丝分裂中的作用进行了研究，发现降低p-VASP S157水平，可使得G2/M期明显延迟，并且p-VASP S157主要是通过其EVH1结构域结合α-微管蛋白来实现这一调控作用的。更为重要的发现是p-VASP S157除了受到PKA、PKG和PKC的调控之外，其磷酸化受到Aurora A激酶的调控。研究结果表明，p-VASP S157参与细胞周期调控，降低p-VASP S157可促进肿瘤细胞的凋亡，抑制肿瘤细胞的增殖，其发挥作用受到Aurora A激酶的调控。