婴幼儿血管瘤中间充质细胞的分离及体外培养模型和裸鼠移植模型的建立

本课题研究婴幼儿血管瘤是否起源于异常的间充质细胞，并应用血管瘤间充质细胞建立婴幼儿血管瘤的体外培养模型和裸鼠移植模型。主要内容包括:①采用免疫组化和RT-PCR技术检测间充质细胞标记抗原在血管瘤组织中的表达，明确血管瘤中间充质细胞分布和表型。②采用免疫电镜技术定位血管瘤中的间充质细胞并观察其超微结构。③分离血管瘤中的间充质细胞，培养增殖，观察细胞生长过程。④在细胞培养的不同阶段，采用细胞免疫化学技术检测各种血管瘤细胞的标记抗原的表达，通过抗原表型的变化追踪血管瘤间充质细胞的分化过程。⑤将血管瘤间充质细胞接种于三维胶原凝胶培养模型，诱导间充质细胞分化为内皮细胞和周细胞，采用HE染色和扫描电镜观察培养模型中微血管发生和发展。⑥将血管瘤间充质细胞种植于裸鼠皮下，观察局部是否生长出血管瘤样结构，并与人婴幼儿血管瘤对照，鉴定动物模型的真实性和可靠性。