基于LPS-TLR4信号通路和Treg，研究连翘抗内毒素的作用机制

内毒素血症通过SIRS最终导致MODS是致死的主要途径，在这一过程中机体免疫调节的异常起着至关重要的作用。TLR4是内毒素跨膜信号转导的关键受体，LPS-TLR4信号通路过度激活引起机体产生失控性炎症反应；Treg是一种抑制性T细胞，它可调控机体的免疫反应，即可有效预防和消除病原体感染，又不导致过度的免疫病理损伤。LPS可激活TLR4并影响Treg，而TLR4和Treg之间又相互影响。连翘具有抗内毒素和免疫调节作用，但其确切的作用机制未明，它对内毒素血症导致MODS发生的重要环节LPS-TLR4和Treg的改变是否有影响及其机理，尚无报道。为此，本项目拟在体外和体内内毒素血症模型中研究探讨连翘不同成分对TLR4和Treg的影响，以期从LPS-TLR4信号通路和Treg途径阐明中药连翘提取物的抗内毒素作用和免疫调节作用及其机制，为连翘防治内毒素血症及其所致的MODS提供新的思路和靶点。

1.本研究按计划基本完成了课题申请书中的研究内容，即(1)连翘有效成分的提取和确定(2)体内外研究观察连翘对TLR4和Treg的影响，取得了预期的研究结果，达到了既定的研究目标，为连翘防治内毒素血症及其所致的MODS提供重要的实验和理论依据。.2.主要研究成果.2.1科学发现和创新：.连翘抗内毒素作用报道不多，它的确切作用机制尚不清楚，它在 LPS-TLR4信号转导通路这一内毒素血症导致疾病发生重要环节中的作用未见研究报道。本研究完成了连翘有效成分的分离提取，首次发现并确定其主要有效抗内毒素成分为连翘脂苷A；连翘酯苷A预处理能抑制LPS作用的小鼠巨噬细胞RAW264.7内TLR4和Foxp3的上调；腹腔给药可降低内毒素血症小鼠外周血ET、Treg水平，并可使高表达的TLR4和Foxp3下调，从整体、细胞和分子水平部分证实了连翘酯苷A具有抗内毒素作用和免疫调节作用，其作用机制可能与其干扰LPS-TLR4-MyD88-NF-κB跨膜信号转导通路和Foxp3基因的调节有关，这是本研究的创新之处。本研究在国内外首次系统地探明了连翘酯苷A的抗内毒素作用及其机制，这可从理论上充实和丰富本领域内的药理学内容，所获的研究资料可为全身性感染的临床药物救治提供有价值的参考资料，增添一种有效的抗内毒素药物。.2.2发表论文.在国家级杂志上发表和录用论文5篇，其中CSCD-C库3篇。.（1）周林，谢勇，傅颖珺等. 连翘酯苷A对脂多糖诱发的小鼠急性肺损伤的保护作用.细胞与分子免疫学杂志，2014；30(2)：151-154.（2）苑伟，杨慧，傅颖珺等.连翘酯苷A对全身内毒素血症小鼠调节性T细胞的影响，中成药，2014,6.（3）苑伟，傅颖珺.中药对调节性T细胞免疫调节功能的研究进展，中成药，2014,4.（4）周林，杨慧，傅颖珺.中药单体抗TNF-α介导的炎症反应机制研究进展，南昌大学学报（医学版），2013；53(3)：72-75.（5）况荣华，周林，傅颖珺.中药以LPS-TL4为作用靶点的抗炎机制的研究进展.南昌大学学报（医学版），2011；51(10)：89-92..2.3人才培养.按计划培养硕士研究生2名,一名已顺利毕业，完成毕业论文一篇，另一名2014年即将毕业。