Klotho介导高糖诱导的血管平滑肌细胞向成骨细胞转分化分子机制研究

中层动脉钙化是造成糖尿病大血管并发症的重要原因。血管平滑肌细胞向成骨样细胞转分化(VSMC转分化)是决定中层动脉钙化的关键机制。本课题探讨Klotho蛋白调控高糖所致VSMC转分化的作用。观察糖尿病动物血管内Klotho表达和变化；利用质粒(pCMV-Klotho)转染技术，观察Klotho能否引发VSMC细胞表形的变化，同时比较与高糖作用的关系。应用 "RNA干扰"技术，抑制VSMC细胞Klotho的表达，观察能否影响高糖诱导的VSMC转分化现象。观察高度表达Klotho的细胞钙离子通道TRPV5和钠依赖磷共同转运体表达的变化，以及抑制磷转运体活性对高表达Klotho的VSMC细胞结构与功能的影响。本课题将着重探讨Klotho蛋白在高糖诱导VSMC转分化过程中是否是关键调控蛋白。本研究将有助于人们从分子生物学水平认识糖尿病大血管并发症的致病机制，还可能为未来设计全新的治疗方案提供理论基础

中层动脉钙化是造成糖尿病大血管并发症的重要原因。血管平滑肌细胞向成骨样细胞转分化(VSMC 转分化)是决定中层动脉钙化的关键机制。本课题探讨Klotho 蛋白调控高糖所致VSMC 转分化的作用。观察糖尿病动物血管内Klotho 表达下降；利用质粒(pCMV-Klotho)转染技术，发现上调Klotho 能减轻高糖导致的VSMC 细胞表形的变化。应用 "RNA 干扰"技术，抑制VSMC 细胞Klotho 的表达，能够加重高糖诱导的VSMC 转分化现象。高度表达Klotho 的细胞通过调节钙离子通道TRPV5 和钠依赖磷共同转运体的表达，而抑制磷转运体活性后，高表达Klotho 保护VSMC 的细胞结构与功能。本课题着重探讨Klotho 蛋白在高糖诱导VSMC 转分化过程中是否是关键调控蛋白。本研究将有助于人们从分子生物学水平认识糖尿病大血管并发症的致病机制，还可能为未来设计全新的治疗方案提供理论基础。