MRF基因修饰的少突胶质前体细胞联合雪旺细胞移植修复脊髓损伤

理论上，少突胶质前体细胞（OPCs）移植是脊髓损伤修复的理想策略之一。然而，OPCs移植到脊髓损伤部位后也存在以下问题：(1)不易存活；(2)抑制轴突再生；（3）很少分化为成髓鞘的少突胶质细胞(OLs)。因而限制了其应用。我们前期研究发现，雪旺细胞（SCs）移植不仅可以促进损伤的轴突再生，还可促进OPCs的存活、增殖和迁移，提示SCs和OPCs共移植有望解决单独OPCs移植不易存活和抑制轴突再生的问题。髓鞘基因调节因子(MRF)是新近发现的一种可促进OPCs向OLs分化和成髓鞘的转录因子，有可能成为通过基因修饰解决OPCs分化和成髓鞘问题的关键靶点。因此，本项目拟将MRF基因修饰的OPCs和SCs共移植到损伤的大鼠脊髓，追踪OPCs在宿主体内的存活、增殖、迁移和分化，分析损伤动物脊髓功能的恢复情况，并探讨功能恢复的机制。本研究有望为临床脊髓损伤修复寻找新策略并提供理论和实验依据。

理论上，少突胶质前体细胞（OPCs）移植是脊髓损伤修复的理想策略之一。然而，OPCs 移植到脊髓损伤部位后也存在以下问题：(1)不易存活；(2)抑制轴突再生；（3）很少分化为成髓鞘的少突胶质细胞(OLs)。因而限制了其应用。我们前期研究发现，雪旺细胞（SCs）移植不仅可以促进损伤的轴突再生，还可促进OPCs 的存活、增殖和迁移，提示SCs和OPCs 共移植有望解决单独OPCs 移植不易存活和抑制轴突再生的问题。髓鞘基因调节因子(MRF)是新近发现的一种可促进OPCs 向OLs 分化和成髓鞘的转录因子，有可能成为通过基因修饰解决OPCs 分化和成髓鞘问题的关键靶点。因此，本课题的预期目标是将MRF基因修饰的OPCs和SCs共移植到损伤的大鼠脊髓，追踪 OPCs 在宿主体内的存活、增殖、迁移和分化，分析损伤动物脊髓功能的恢复情况，并探讨功能恢复的机制。我们已经按计划开展了研究工作，证明SCs共移植能够解决单独移植OPCs不易存活的关键性难题，可使更多的OPCs在脊髓损伤部位和周围存活、增殖、迁移并分化为成髓鞘的少突胶质细胞；通过 MRF基因修饰，增加移植的OPCs向OLs分化和成髓鞘的能力。SCs的共移植和OPCs的MRF基因修饰更好地促进脊髓损伤动物的功能恢复。在此基础上探讨了SCs和MRF基因修饰影响OPCs功能并最终促进脊髓损伤动物功能恢复的机制,鉴定了SCs促进OPCs增殖和迁移的关键因子。此外，还鉴定了介导B104CM诱导OPCs增殖的关键分子, 应用Olig2基因修饰的神经干细胞移植联合髓鞘碱性蛋白激活的T细胞过继免疫治疗脊髓损伤，检测了骨形态发生蛋白（BMPs）在神经细胞的表达。到目前为止，本课题已发表论文12篇，其中SCI论文9篇；还有一篇重要论文已投SCI收录杂志。本项目培养研究生5名，青年科研人员6名，参加国内、国际学术会议交流6人次。综上所述，本课题已按计划圆满完成，达到预期研究目标。