基于Eppin蛋白B细胞表位的新型DNA避孕疫苗的分子设计、构建与效应研究

研发有效的男性避孕疫苗是计划生育领域的重要课题。特异表达于睾丸和附睾的Eppin蛋白是极具前景的靶标。我们前期研究发现，抗-Eppin抗体在体外能有效抑制精子活力，但Eppin蛋白免疫小鼠避孕效果并不理想，推测与附睾管内抗体滴度不高有关。经粘膜途径免疫能有效激发生殖道局部分泌型抗体产生，故本研究在前期已筛选出Eppin优势中和B细胞表位的基础上，拟设计、构建靶向粘膜的新型疫苗。即将M细胞靶向肽RGD与具有穿膜活性的HIV-1 TAT连接作为包装肽，包裹双盒表达质粒（同时编码基因佐剂IL-4与Eppin B细胞表位），制备成靶向M细胞的"模拟病毒"颗粒型疫苗，经鼻粘膜途径免疫雄性小鼠，观察其靶向及进入M细胞的能力、体内转染时空效应、诱导Th2极化效应和体液/粘膜免疫应答情况，探讨抗生育的有效性及安全性。本策略可望克服传统疫苗难以在生殖道局部诱发高滴度抗体的局限，为男性避孕疫苗的研发开拓新途径

研发有效的男性避孕疫苗是计划生育领域的重要课题。特异表达于睾丸和附睾的Eppin蛋白是极具前景的靶标。我们前期研究发现，抗-Eppin抗体在体外能有效抑制精子活力，但Eppin蛋白免疫小鼠避孕效果并不理想，推测与附睾管内抗体滴度不高有关。经粘膜途径免疫能有效激发生殖道局部分泌型抗体产生，故本研究在前期已筛选出Eppin优势中和B细胞表位的基础上设计并构建了靶向粘膜的新型疫苗。即将M细胞靶向肽RGD与具有穿膜活性的HIV-1 TAT连接作为包装肽，包裹双盒表达质粒（同时编码基因佐剂IL-4与Eppin B细胞表位），制备成靶向M细胞的"模拟病毒"颗粒型疫苗，经鼻粘膜途径免疫雄性小鼠，发现经鼻免疫雄鼠能在其体内产生高滴度的抗-Eppin抗体，雄鼠使雌鼠受孕能力显著降低。被免疫雄鼠血清睾酮水平及睾丸附睾病理学检查均无异常。本策略为男性避孕疫苗的研发开拓了新途径。