“循环”Tfh细胞在抗CCP抗体产生中的作用及调控机制

抗环瓜氨酸蛋白抗体（ACPA）在类风湿关节炎(RA)关节损伤中起到重要的"启动"作用，但其产生机制及调控因素至今不清。滤泡辅助T细胞（Tfh）定位于生发中心，在抗体产生过程中发挥"决定性"作用。最新研究证实外周血CD4+/CXCR5+ T细胞具有Tfh细胞潜质称为"循环"Tfh，在抗体产生中发挥重要作用。我们前期的研究发现RA患者外周血"循环"Tfh数量是正常人3倍且和ACPA滴度呈正相关，推测其参与自身抗体ACPA生成。本项目拟应用MACS法分选外周血"循环"Tfh，通过分析其表面分子、转录因子（Bcl-6、Blimp-1）、共刺激分子(ICOS、CD40L)及细胞因子(IL-21、IL-27)筛选Tfh前体细胞亚型。采用siRNA基因沉默在体外培养及SCID模型上验证其对原始B细胞及ACPA特异性B细胞活化作用，分析其在ACPA产生中作用及调控因素，旨在为RA的早期治疗提供新的靶点。

抗环瓜氨酸蛋白抗体（ACPA）在类风湿关节炎(RA)关节损伤中起到重要的“启动”作用，但其产生机制及调控因素至今不清。近年来的研究表明，滤泡辅助T细胞（Tfh）定位于生发中心，在抗体产生过程中发挥“决定性”作用。但Tfh定位于次级淋巴组织（脾脏、淋巴结）的生发中心，人体获取标本困难，给Tfh临床研究带来困难。最新研究证实外周血CD4+/CXCR5+ T细胞某些亚型具有Tfh细胞潜质称为“循环”Tfh，在抗体产生中发挥重要作用，那么其是否也在自身抗体的产生中发挥重要作用？.我们课题组对RA患者外周血“循环”Tfh细胞亚型进行分析，流式细胞术分析首次证实RA患者外周血CD4+/CXCR5+/CCR6+亚群（Th17 like subtype）T细胞数量显著升高且和ACPA滴度呈正相关，该群细胞数量和ACPA及MCV抗体滴度显著相关，而和ESR、CRP无明显相关，提示CD4+ CXCR5+ CCR6+ 亚型可能参与类风湿关节炎自身抗体的产生。功能学研究表明：功能学分析表明，CD4+ CXCR5+ CCR6+ T细胞活化后高表达PD-1、CD40L、ICOS、低表达CCR7并分泌IL-21，PCR结果显示该群细胞高表达转录分子Bcl-6而低表达blimp-1，提示其具有Tfh细胞潜质，而CD4+/CXCR5+/ CXCR3+（Th1 like subtype）和CD4+/CXCR5+/CXCR3- /CCR6-（Th2 like subtype）并无上述特征。.上述结果表明，外周血Th17 like Tfh细胞具有Tfh细胞潜质，可能在类风湿关节炎自身抗体产生过程中发挥重要作用。