紫花杜鹃中新颖杂萜化合物的定向分离及其抗COPD的作用研究

Oxidative stress is closely related to the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Discovering for the possible therapies against the destruction by oxidation is a new tendency for intervention in COPD. The Rhododendron amesiae has been traditionally used for the treatment of cough and asthma. A new approach for rapid discovery of meroterpenoids from the extract of Rhododendron amesiae will be established using neutral loss/precursor ion scanning combined with statistical analysis (NL/PRE-PCA). The outlier groups will be traced back to retention time and fragment ions. Then the target meroterpenoids will be purified by LC/MS-guided separation. The effects and mechanisms of the isolated meroterpenoids against oxidation will also be investigated. Our project aims to establish an approach for rapid discovery and target purification of meroterpenoids from a complex matrix, and search for the leading compounds based on a better understanding of the underlying pathophysiology，which may bring novel avenues for treatment of COPD.

氧化应激失衡与慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病机制密切相关。探究一种激活内源性抗氧化剂生成通路，保护支气管及肺泡上皮细胞免受氧化应激所致损伤的药物是防治COPD的新趋势。紫花杜鹃用于止咳平喘，临床疗效确切。本项目拟以紫花杜鹃为研究对象，应用“质谱中性丢失/母离子扫描-多元统计分析联用技术（NL/PRE-PCA）”快速发现杂萜成分，通过追溯裂解碎片、保留时间等信息准确定位，运用现代制备分离手段定向分离杂萜单体化合物，并进一步探究其对香烟烟雾提取物诱导肺泡上皮细胞氧化损伤的保护活性及作用机制。本项目巧妙利用杂萜的结构特点，建立快速检测和定向分离的集成技术；针对COPD的发病机制进行药理活性研究，有望获得对防治COPD有潜在应用价值的先导化合物。

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)已成为威胁人类健康的世界第四大致死性疾病。磷酸二酯酶4型（PDE4）作为COPD的药物治疗新靶点备受关注。本项目旨在从紫花杜鹃中寻找治疗COPD的先导化合物。通过多种色谱手段对紫花杜鹃叶分离，得到20个单体化合物，利用波谱学方法对其结构鉴定。其中包括6个二萜类化合物，6个三萜类化合物，7个黄酮类化合物，以及1个脂肪酸类化合物。通过对紫花杜鹃的系统分离，阐明了该植物的化学成分，为植物分类学以及活性物质的发现奠定了基础。PDE4抑制活性实验表明，分离所得二萜类化合物对PDE4没有抑制作用，三萜类化合物部分表现出弱的抑制作用，黄酮类化合物具有中等强度抑制作用。分子对接结果显示，黄酮类化合物通过氢键及π-π键与PDE4的Q口袋结合。运用LPS诱导RAW264.7细胞模型，检测出二萜类化合物均可以很好地抑制NO释放。此外，本项目对分离所得木藜芦烷型二萜的质谱裂解规律进行了总结，为该类成分的快速分离奠定了基础。最后，为进一步寻找新型PDE4抑制剂，在国家自然科学基金的支持下，对止咳平喘中药翠云草进行了活性导向分离，得到了14个具有PDE4抑制活性的单体化合物，其中包括2个新化合物。