Wnt3a通过MITF-M促进毛囊黑素母细胞分化和黑素形成的机制研究

白癜风是一种病因不明的难治性脱色素性疾病，目前认为毛囊中的黑素母细胞可作为白癜风治疗的黑素细胞库，在皮损区发现MITF表达的显著下降可能是导致色素形成障碍的主要原因。本研究以前期工作建立的永生化的黑素母细胞为体外模型，筛选发现Wnt3a具有明显的促黑素母细胞分化和黑素形成的能力，并上调黑素细胞特异性MITF-M的表达。进一步将运用DCT-LacZ转基因鼠作为体内模型，观察Wnt3a激活毛囊内黑素母细胞并促进黑素形成的作用方式，并从分子、细胞水平阐明Wnt3a通过Wnt/β-catenin经典通路激活MITF-M的表达，并相互共同作用，促进黑素形成的作用机制。帮助了解白癜风等色素障碍性疾病的发病机制，为临床有效治疗各种色素减退性疾病提供重要的理论依据和治疗靶点。

毛囊中的黑素母细胞可作为白癜风治疗的黑素细胞库，本研究探讨Wnt信号在黑素母细胞激活中的作用机制，为了解白癜风等色素障碍性疾病的发病机制，为临床有效治疗各种色素减退性疾病提供重要的理论依据和治疗靶点。本研究以建立的永生化黑素母细胞为体外模型，筛选发现Wnt3a具有明显的促黑素母细胞分化和黑素形成的能力，能显著上调黑素细胞酪氨酸酶活性、黑素细胞分化标志的表达。并以DCT-LacZ转基因鼠作为动物模型，皮下注射Ad-Wnt3a病毒能显著激活静止期毛囊内黑素母细胞，促进皮肤毛囊中的黑素形成。wnt3a显著激活黑素细胞中的Wnt/β-catenin经典通路，上调MITF-M的表达，抑制MITF-M的表达可以显著下调Wnt3a的作用，提示Wnt3a通过调节MITF-M促黑素母细胞分化和黑素形成。为进一步揭示Wnt经典通路和MITF-M的关系，利用报告基因系统检测MITF-M与β-catenin联合作用后能显著提高酪氨酸酶启动子的转录活性，Chip检测显示β-catenin能特异性结合MITF-M的启动子位点，提示wnt3a通过激活β-catenin转录活性，调节MITF-M的转录，并与MITF-M共同作用，调节酪氨酸酶的表达，促进黑素母细胞的分化和黑素形成。此外，发现sfrp5能明显抑制Wnt3a经典通路的激活，抑制黑素母细胞的分化和黑素形成。该研究证实wnt经典通路在毛囊黑素母细胞分化中的作用和分子机制，为色素障碍性疾病的发病机制和治疗提供理论依据。发表SCI论文1篇，中文论文2篇，培养硕士研究生一名，获得中华医学会医学细胞生物学优秀论文奖。