CXCL16调控DLBCL微环境中单核/巨噬细胞表型、功能及机制研究

Tumor associated macrophages (TAM)-focused therapeutic strategies have the potential to complement chemotherapy and immunotherapy. The influence of Macrophages(MΦ) on tumor progression depends on their phenotype, but the phenotype and function of TAM in diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) remains unclear. Chemokines in tumor microenvironment may play roles in monocytes (Mo) attraction and development. Our recent studies found that CD68+ Mo/MΦ in DLBCL expressed CXCR6, and the density of CD68+ Mo/MΦ correlated with CXCL16 level in DLBCL tissue. Furthermore, co-expression of CXCL16 and CXCR6 is a risk factor for poor prognosis of patients with DLBCL. Based on these, we will combine clinical sample analysis and ex vivo experimental studies to: (1) evaluate the revelance among CXCL16, CD68+ Mo/MΦ and the prognosis of DLBCL patients; (2) detect the influence of CXCL16 on the phenotypic and functional changes of Mo/MΦ in DLBCL microenviroment; (3) define key molecules and signaling pathways regulating the CXCL16-affected-Mo/MΦ development; (4) verify the relative mechanisms obtained through the above experiments in clinical samples. The prospective results would not only help to unveil the novel mechanisms of MΦ regulation by tumor environment through CXCL16, but would also contribute to the rational design of MΦ function-dependent, immune-based therapies.

针对肿瘤相关巨噬细胞（TAM）的肿瘤治疗策略潜力极大，但弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中TAM的表型和功能尚未清晰。微环境中的趋化因子可能参与TAM的功能调控。我们新近发现：DLBCL组织中单核/巨噬细胞高表达CXCR6，且CD68+单核/巨噬细胞的密度与组织的CXCL16表达水平正相关；而CXCL16与其受体CXCR6的共同高表达提示病人不良的预后。本课题拟：首先进一步明确CXCL16和TAM在人DLBCL组织中的表达、分布及与临床特征相关性；然后通过体外诱导培养模型观察CXCL16对DLBCL微环境中单核/巨噬细胞表型、极化功能的影响，以及进而与肿瘤细胞发生的交互作用；并探讨微环境中CXCL16影响TAM表型和功能的初步机制，筛选出1-2种关键分子靶点；最后在临床病例组织中验证，探究其潜在的临床意义。本研究将为基于免疫微环境的肿瘤机制研究提供实验依据，亦为免疫治疗提供新的切入点。

针对肿瘤相关巨噬细胞（TAM）的肿瘤治疗策略潜力极大，但弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中TAM的表型和功能尚未清晰。微环境中的趋化因子可能参与TAM的功能调控。我们的前期研究发现：趋化因子CXCL16在DLBCL肿瘤组织中表达上调，且其与受体CXCR6的共同高表达提示病人不良的预后，而DLBCL组织中的单核/巨噬细胞表达CXCR6。基于前期发现，在本项目的支持下，我们首先用病人组织免疫组化染色确定人DLBCL组织中CXCL16的表达量与CD68+单核/巨噬细胞数量呈正相关；其次体外实验证实CXCL16能够促进单核细胞的迁移；CXCL16促进单核细胞上调表达CD206、下调表达CD86和HLA-DR，向M2型巨噬细胞方向分化，且CXCL16促进单核细胞表达免疫抑制性分子PD-L1。此外，DLBCL肿瘤细胞分泌的上清促进单核细胞上调表达CXCL16的受体CXCR6。最后借助生信分析探究CXCL16影响生物学功能的可能通路，结果显示CXCL16在DLBCL组织中的高表达与MAPK、STAT3通路激活正相关。.我们在进行第一个项目研究时意外发现：另一种国内较为高发的非霍奇金淋巴瘤——结外NK/T细胞淋巴瘤（ENKTL）肿瘤组织中除浸润单核/巨噬细胞外，还浸润着B淋巴细胞，且不同病人肿瘤组织中浸润的B淋巴细胞密度相差很大。基于此现象，我们进一步探究ENKTL肿瘤组织中浸润的B淋巴细胞的表型、功能及临床意义。我们首先发现在56例ENKTL病人肿瘤组织中浸润的B淋巴细胞密度与病人总生存时间呈正相关，CD20可作为预后预测标志；进而鉴定出ENKTL肿瘤组织中浸润的B淋巴细胞呈现活化的成熟表型；再次发现B淋巴细胞在体外抑制 ENKTL肿瘤细胞的增殖，且病人肿瘤组织内B细胞浸润的密度与肿瘤细胞的Ki67增殖指数负相关，提示B淋巴细胞可能起到抑制肿瘤增殖的作用。