EGCG调控miR-344a/484抗良性前列腺增生的作用和机制研究

The incidence of benign prostate hyperplasia (BPH) increases year by year. Lower urinary tract symptoms (LUTS) caused by BPH seriously affect the life quality of patients. Studies show that glandular hyperplasia and fibrosis are the key factors for LUTS caused by BPH. And HIF-1α is a core node in the process of glandular hyperplasia and fibrosis under the prostatic hypoxia microenvironment in BPH. We found that the prostatic levels of miR-344a/484 were decreased in BPH via high throughput sequencing. Moreover, cellular preliminary experiment indicated that there was a negative correlation between the levels of miR-344a/484 and HIF-1α. We also confirmed that epigallocatechin-3-gallate (EGCG) could ameliorate BPH and increase the prostatic levels of miR-344a/484 in rats. Therefore, we propose that miR-344a/484 improve the glandular hyperplasia and fibrosis in BPH via inhibiting the expression of HIF-1α, and EGCG attenuates BPH through up-regulating miR-344a/484. The aim of this project is to confirm these hypotheses via up-regulating or down-regulating miR-344a/484, silencing or lentivirus transfection over-expressing HIF-1α, and introducing HIF-1α high expression transgenic mice. It is expected to provide a new strategy for the treatment of BPH.

良性前列腺增生（BPH）发病率逐年升高,其引起的下尿路症状（LUTS）严重影响患者的生活质量。研究表明腺体增生和纤维化是BPH导致LUTS的关键之一，而HIF-1α是BPH缺氧微环境刺激腺体增生和纤维化的核心节点。我们通过高通量测序发现BPH病程中存在miR-344a/484水平降低的现象。细胞预实验提示miR-344a/484与HIF-1α表达呈负相关。同时我们证实表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）能改善大鼠BPH，上调miR-344a/484。因此提出miR-344a/484调控HIF-1α表达而改善BPH病程的腺体增生和纤维化，EGCG的抗BPH效应与上调miR-344a/484有关。并拟在不同层面通过上调或抑制miR-344a/484、基因沉默或慢病毒转染过表达HIF-1α及引入HIF-1α高表达转基因小鼠予以证实，有望为BPH的治疗提供新的策略。

良性前列腺增生（BPH）是中老年男性的常见疾病，也是男性出现下尿路症状（LUTS）的最常见原因，给患者的日常生活造成极度的烦恼和巨大的经济压力。本项目中，我们一方面通过人源良性前列腺增生BPH-1细胞株和大鼠的BPH模型，联合HIF-1α选择性抑制剂YC-1，探讨EGCG抗BPH的作用机制。另一方面，我们模拟多种危险因素诱导的前列腺纤维化，分别建立了雄性激素（丙酸睾酮）、TGF-β1和bFGF诱导的人前列腺基质细胞WPMY-1增殖与胶原沉积模型，以及慢性烟雾暴露诱导的大鼠BPH/LUTS、WPMY-1和人前列腺上皮细胞胶原沉积模型。针对上皮-间质转化（EMT）和胶原沉积的相关调控靶标，综合运用微小RNA（miRNAs）和全转录组高通量测序、流式细胞检测、特异性靶点阻断剂功能剥夺等手段，探讨表观遗传因素在前列腺纤维病变中的可能作用和表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）的调节效应。通过以上研究我们发现① 阻断SHH信号通路能够改善前列腺EMT和纤维化。EGCG防治前列腺纤维化的效应与抑制SHH信号通路有关。② 良性前列腺增生组织中miR-378a-5p水平下降，且miR-378a-5p mimic能够抑制前列腺EMT和SHH信号通路。EGCG能够上调前列腺上皮细胞和良性前列腺增生组织中的miR-378a-5p等水平。③ 前列腺基质细胞来源外泌体诱导上皮细胞EMT和胶原沉积。多种危险因素均升高外泌体circ_0109315的水平，circ_0109315具有海绵抑制miR-378a-5p的潜力。EGCG能够下调基质细胞来源外泌体circ_0109315的水平。不仅如此，我们进一步完善了相对于正常对照，BPH前列腺显著性表达差异的环状RNA（circRNAs）、长链RNA（lncRNAs）、miRNAs和mRNAs等信息。本项目成果为扩大绿茶的应用领域奠定了理论依据，给前列腺增生和纤维化的防治提供了新的线索。