从肥大细胞-FLS信号自身放大系统途径探讨资木瓜总苷抗RA作用机制

Rheumatoid arthritis (RA), which is characterized histologically by cancer-like synovial hyperplasia, joint and bone destruction, is major teratogenic, disabling disease influencing people's physical and mental health. Research showed that mast cells accumulation and activation in RA joint synovial hyperplasia tissues were important reason for RA synovial hyperplasia. Therefore, inhibiting mast cells activation in joint synovial hyperplasia tissues was expected to achieve effective prevention and treatment for RA. In previous experiments, we found that the total saponins extracted from chaenomeles speciosa (TSCS) could inhibit activation of mast cells, reduce tryptase expression, and thus relieve synovial hyperplasia, on experimental arthritis. Based on these findings, in this project, we will further use K/BxN mice serum arthritis model and mast cells-FLS cells (Fibroblast-like Synoviocytes) co-culture system to explore the functions of TSCS in inhibiting mast cell's activation and promoting FLS cell's apoptosis via mast cells-Tryptase-PAR-2- Rho-FLS signaling self-amplification system pathway in vivo and in vitro and to illustrate the underlying molecular mechanism of TSCS in anti-RA. The successful implementation of this project will provide theoretical and experimental basis for development of new anti-RA drugs that target in the mast cells.

类风湿关节炎（RA）是以关节滑膜类肿瘤样增生、关节骨质破坏为主要特征，严重影响人民身心健康的重大致畸、致残性疾病。研究显示，在RA关节滑膜增生组织中肥大细胞的大量积聚并活化是促进RA滑膜异常增生的重要原因，因此通过抑制关节滑膜组织中肥大细胞活化，可望达到有效预防和治疗RA的目的。前期实验中我们发现，资木瓜有效成分资木瓜总苷可能通过抑制肥大细胞活化，降低类胰蛋白酶（Tryptase）表达，由此减轻滑膜增生，对实验性关节炎起治疗作用。本项目拟在此基础上，进一步利用K/BxN小鼠血清性关节炎模型，建立肥大细胞-FLS细胞（成纤维样滑膜细胞）共培养体系，通过体内和体外实验，探讨资木瓜总苷经肥大细胞-Tryptase-PAR-2-Rho-FLS信号自身放大系统途径，抑制肥大细胞活化，促进FLS细胞凋亡的分子机理，以阐明资木瓜总苷抗RA作用机制，为以肥大细胞为靶点的新型抗RA药物研究提供理论和实验依据

类风湿关节炎（RA）是以关节滑膜类肿瘤样增生、关节骨质破坏为主要特征，严重影响人民身心健康的重大致畸、致残性疾病。研究显示，在 RA 关节滑膜增生组织中肥大细胞的大量积聚并活化是促进 RA 滑膜异常增生的重要原因，因此通过抑制关节滑膜组织中肥大细胞活化，可望达到有效预防和治疗 RA 的目的。因此，本项目使用两种肥大细胞缺乏的KO小鼠（Kitw/kitw-v小鼠和Kitw-4Bao小鼠）,通过骨髓培养、移植重新建立关节肥大细胞，并分别使用小鼠CIA关节炎模型和小鼠K/BxN血清性关节炎模型，证实肥大细胞活化在RA发病中起关键作用，同时使用资木瓜总苷干预治疗，通过抑制肥大细胞活化，降低Tryptase、 PAR-2、 SCF、 C-kit、IL-6、IL-17等表达，升高Treg细胞活性，恢复IL-17/Treg轴和Th1/ Th2平衡，促进滑膜细胞凋亡，减轻滑膜细胞增生，对小鼠关节炎起治疗作用。进而建立肥大细胞-FLS 细胞共培养体系，资木瓜总苷通过抑制肥大细胞释放的Tryptase，进而阻断Tryptase-PAR-2-Rho-FLS信号途径，促进FLS的凋亡。同时通过系统化学分离法，结合LC-MS、NMR等现代仪器分析方法和药效活性评价手段，分离鉴定资木瓜总苷所含主要单体活性成分--莽草酸丁酯。从肥大细胞-成纤维样滑膜细胞相互作用这一视角，初步探讨资木瓜总苷以肥大细胞为靶点进而作用于FLS的抗RA作用机制，对抗RA新药研究和治疗，提供理论和实验依据，具有重要的临床意义和应用前景。