脑缺血再灌注后小胶质细胞表达的TLR9信号通路的双向作用及机制研究

小胶质细胞在脑缺血后炎症反应中有促炎症损伤和神经保护的"双刃剑"作用，但机制不清楚。我们前期研究发现脑缺血再灌注不同阶段受体TLR9通路的多个信号分子不同程度表达。故提出假说:TLR9通路的双向调控介导小胶质细胞起损伤或保护作用，即早期TLR9主要激活NFκB－TNFα/IL-1β途径，引起炎症损伤；而后期TLR9主要激活IRF7－IFNβ途径，起神经保护作用；不同阶段激活的差异与反馈抑制因子的产生有关。本项目利用脑缺血再灌注的小鼠和神经细胞模型，运用免疫荧光、western-blot、siRNA、流式细胞术、ELISA等方法，观察TLR9激活的生物学效应和抑制因子对TLR9信号转导的影响，获得TLR9通路在不同阶段起双向作用的可靠证据，阐明小胶质细胞"双刃剑"作用的分子机制和TLR9激活后从促炎通路向保护通路转换的机制，为确立TLR9信号分子作为脑梗死阶段性治疗的新靶点提供充分的科学依据

小胶质细胞在脑缺血后炎症反应中有促炎症损伤和神经保护的“双刃剑”作用，但机制不清楚。TLR9具有促炎症和细胞保护两条不同的信号转导通路，可能在小胶质细胞的“双刃剑”效应中发挥重要的作用。本项目利用脑缺血再灌注的小鼠和神经细胞模型，运用免疫荧光、western-blot、siRNA、流式细胞术、ELISA等方法开展研究，发现脑梗死灶边缘区TLR9长时程表达上调，而且选择性在小胶质细胞激活；缺血再灌注后小胶质细胞TLR9促炎信号通路（NFκB－TNFα/IL-1β）和细胞保护通路（IRF7－IFNβ）先后被激活；缺血再灌注后早期抑制TLR9的表达起神经保护作用。在国际上首次证实脑缺血再灌注后小胶质细胞是TLR9活化的主要神经细胞，阐明TLR9信号通路的双向激活可能是小胶质细胞“双刃剑”作用的机制之一，TLR9可作为脑梗死治疗的新靶标，为开展TLR9拮抗剂治疗脑梗死的临床转化研究提供了实验依据。