一种bFGF短肽疫苗通过靶向癌细胞和肿瘤微血管的双重免疫治疗肝癌的研究

Basic Fibroblast Growth Factor（bFGF） is an important angiogenesis factor. It plays a key role in tumor growth and cancerometastasis as a mitogen for endothelial cells. Due to the overexpressing of bFGF in vascular endothelial cells ,in previous studies we employed a truncated bFGF peptide as antigen and CpG DNA as adjuvant to induce bFGF-specific cytotoxic T lymphoeytes(CTLs) to kill vascular endothelial cells for inhibiting tumor angiogenesis. The results showed that the administration had inhibited tumor neovascularization and therefore tumor growth was surpressed. Moreover，some other investigations have shown that bFGF is also overexpressed in hepatoma carcinoma cells. Basing on these, we try to explore the double immunotherapy mechanism for hepatoma by inducing bFGF-specific cytotoxic T lymphocytes to selectively kill both endothelial cells and hepatoma carcinoma cells.

碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是重要的促血管生成因子，它不仅参与肿瘤新生血管的形成，还能刺激血管内皮细胞的增殖和分化并提高血管通透性而促进癌细胞的转移。bFGF在血管内皮细胞内高表达，因此我们前期的研究利用一种改造的人源的bFGF短肽作为抗原、CpG DNA寡核苷酸作为免疫佐剂免疫小鼠，诱导产生出bFGF特异性毒性T淋巴细胞（CTL），此CTL通过对血管内皮细胞的特异性杀伤从而抑制了肿瘤微血管的生成，进一步抑制了肿瘤的生长。同时前人的研究发现bFGF也在肝癌细胞内高表达，比正常细胞高出很多倍。因此，本研究在以上这些研究基础上，期望通过这种bFGF短肽免疫诱导产生bFGF特异性细胞毒性T淋巴细胞，通过这些毒性T淋巴细胞对形成肿瘤新生血管的内皮细胞以及肝癌细胞同时进行特异性杀伤，去探讨双重免疫治疗的抗癌效果及其机制。

肿瘤的生长和转移与血管生成密切相关，碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是一种促血管生成因子，bFGF的上调表达在黑色素瘤的发生和转移中起重要作用。因此，本研究试图通过免疫靶向bFGF来抑制肿瘤血管生成，同时诱导bFGF特异性细胞毒性T淋巴细胞杀伤黑色素瘤细胞，从而实现双重抗肿瘤活性。我们以人源性bFGF蛋白为异种抗原打破免疫耐受，加入皂苷-脂质体免疫佐剂复合物以增强CTL应答。结果表明，我们的免疫产生了强烈的免疫应答和显著的抗癌活性。CD31免疫组化和藻酸盐包裹实验证明免疫造成对肿瘤微血管生成的抑制，此外，免疫小鼠脾细胞体外抗原刺激后较高的IFN-γ的释放，以及明显的细胞毒性T淋巴细胞杀伤而导致小鼠血管内皮细胞和癌细胞的裂解，说明靶向bFGF的免疫成功诱导bFGF特异性毒性T淋巴细胞增殖和活化，抗肿瘤活性可能主要依赖于这种细胞免疫应答，可能通过免疫诱导的bFGF特异性细胞毒性T淋巴细胞通过裂解血管内皮细胞和杀伤癌细胞带来双重治疗作用。因此我们认为，以bFGF为靶点的免疫治疗可能是治疗黑色素瘤的一种很有效而值得推荐的策略，而皂苷-脂质体组成的复合佐剂在增强细胞毒性T淋巴细胞响应方面非常理想，在未来肿瘤疫苗的研究中值得推广。