缺氧抑制miR-183在食管癌转移中作用及机制研究

The prognosis of esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) is poor because of its highly invasive and metastatic ability, the mechanism of which remains unclear. Our previous study discovered that the expression of miR-183 was negatively correlated with the metastasis of ESCC, using miRA expression profiling assays. Further study revealed that miR-183 could negatively regulate the expression of metastatic- related molecular protein kinase C(PKC), and the miR-183 expression can be obviously inhibited by hypoxia in ESCC cells. Therefore, we suspect that miR-183 can inhibit the ESCC metastasis through negatively regulating of PKC; and the expression of miR-183 can be inhibited in anoxic condition, which results in the loss of the depression effect on PKC expression, and promoting the ESCC metastasis. The present study aims to further investigate the underlying mechanism of hypoxia/miR-183/PKC pathway in ESCC metastasis in tissues and cell lines, which will provide a new insight into the specific biological behavior of miRNAs in ESCC metastasis and would be helpful in the therapeutic application to block ESCC metastasis.

食管鳞状细胞癌因高侵袭及转移性导致患者预后差，其分子机制尚不明确。申请者前期通过miRNA芯片技术筛选发现miR-183表达水平与食管癌转移呈负相关性；进一步研究发现miR-183可负性调控转移相关分子蛋白激酶C（PKC），且缺氧可抑制 miR-183在食管癌细胞中的表达水平，因此提出“在食管癌细胞中，miR-183可通过下调PKC的表达来抑制食管癌转移；在缺氧作用下，miR-183的表达水平下降，失去对PKC的抑制能力最终促使癌细胞发生转移”的假说。本项目将在前期研究基础上，拟通过实体组织标本及细胞模型证实缺氧/miR-183/PKC信号转导通路参与食管癌转移的作用机制，旨在通过转移相关miRNA调控及机理深入研究，进一步阐明食管癌转移分子机制，为食管癌转移预测及干预提供理论依据。

食管鳞状细胞癌因高侵袭及转移性导致患者预后差，其分子机制尚不明确。申请者前期通过miRNA芯片技术筛选发现miR-183表达水平与食管癌转移呈负相关性；进一步研究发现miR-183可负性调控转移相关分子蛋白激酶C（PKC），且缺氧可抑制 miR-183在食管癌细胞中的表达水平，因此提出“在食管癌细胞中，miR-183可通过下调PKC的表达来抑制食管癌转移；在缺氧作用下，miR-183的表达水平下降，失去对PKC的抑制能力最终促使癌细胞发生转移”的假说。本研究通过反复Transwell 实验建立了两对转移潜能差异较大的食管炎细胞系EC109-P、EC109-N及EC9706-P、EC9706-N；通过Real time-PCR证实了miR-183在高转移性细胞系表达水平显著低于地转移表达细胞系；在高、低转移性食管癌组织中同样存在这一现象。上调miR-183表达水平后食管癌细胞转移潜能显著降低，反之亦然。在缺氧条件下培养低转移潜能细胞系后miR-183表达水平显著增强，转移潜能增加，同时PKC表达水平下降；通过荧光报告基因实验证实PKC为miR-183直接靶基因。我们的研究通过实体组织标本及细胞模型证实缺氧/miR-183/PKC信号转导通路参与食管癌转移的作用机制，旨在通过转移相关miRNA调控及机理深入研究，进一步阐明食管癌转移分子机制，为食管癌转移预测及干预提供理论依据。