胰高血糖样肽1与烧伤脓毒症糖代谢障碍的关系及其作用机制的研究

烧伤脓毒症时常伴发高糖血症，其本质是机体组织葡萄糖利用障碍。研究证实，胰岛素调控血糖能够降低危重病患者脓毒症发病率和病死率，但易引发致死性并发症-低糖血症。胰高血糖素样肽1（GLP-1）是新发现的一种肠源性激素，具有高血糖依赖性促胰岛素分泌、降血糖作用，无导致低糖血症的风险。烧伤脓毒症时不可避免的肠组织损伤很可能影响GLP-1的分泌和作用。基于此，本研究拟：⑴通过动物模型，探讨烧伤脓毒症时，①GLP-1分泌变化，及其与肠组织损伤的关系；②检测胰腺β细胞GLP-1受体表达，从受体角度分析GLP-1作用变化的机制；③探讨外源性GLP-1对高糖血症的调控，并从胰岛β细胞增殖分化与凋亡、胰岛素分泌、肝脏和骨骼肌组织糖摄取利用三个方面探讨其作用机制。⑵体外细胞实验，分析GLP-1对肝细胞和骨骼肌细胞糖代谢的调控与信号机制。从而，系统阐明GLP-1在烧伤脓毒症糖代谢紊乱发生、发展中的作用与机制。

目前课题组已经按照课题任务书的计划，顺利完成各项研究内容。.主要完成情况和研究成果：.1)研究发现，在L6细胞中，Ex-4处理后，假伤大鼠血清组和烫伤大鼠血清组p70s6活性都是下降的。在烫伤大鼠血清处理的BRL肝细胞中，Ex-4导致p70s6活性呈浓度依赖性下降；.2)在BRL细胞中，Ex-4处理后，假伤大鼠血清组和烫伤大鼠血清组，p44/42MAPK激酶的活性均降低。在L6细胞中，与假伤组比，烫伤大鼠血清处理后的细胞中p44/42MAPK活性下降(P<0.05)。然而，Ex-4对于p44/42MAPK激酶活性的调控假伤组呈浓度依赖性的下降，烫伤组却呈浓度依赖性的上升；.3)Ex-4能够通过影响成肌细胞的DNA合成器改变细胞周期，及促进细胞从G1期进入S期，使细胞增殖。Ex-4能直接作用于L6细胞，上调p-Akt水平，增强PI3K/Akt信号通路的活性，从而调控L6细胞的增殖；.4)建立50%TBSA严重烫伤/脓毒症大鼠模型；.5)与假伤组相比，烫伤后大鼠空腹血糖均显著升高。糖耐量试验时，烫伤组伤后6h、1d和3d各时间点血糖均显著增高(P<0.05)，而在第7d两组并无显著性差异(P>0.05)；.6)EX-4对烫伤大鼠体重和饮食的研究发现，伤后21d治疗组烫伤大鼠增重显著低于其他各组(P<0.05)；伤后各时间点烫伤+治疗组大鼠饮食量均显著低于假伤组(P<0.05)；.7)HE染色显示，严重烫伤后大鼠胰岛细胞团边界不清，部分胰岛细胞发生破裂，可见炎性浸润，EX-4治疗后有所减轻；.8)TUNEL凋亡检测发现烫伤后胰岛细胞凋亡，伤后1d、3d和5d损伤较为严重，EX-4治疗后胰岛细胞凋亡比例减少；.9)与假伤组相比，烫伤组大鼠可见部分胰岛细胞内无胰岛素免疫荧光, 胰岛素含量减少，提示存在胰岛分泌胰岛素功能下降； .10)核磁共振技术初步研究严重烫伤大鼠伤后胰腺改变发现烫伤后可见胰头、胰体不均一信号改变，且胰头部分增大,有水肿表现，胰腺DWI信号增高。.文章撰写：.撰写文章6篇，已发表文章3篇，其中2篇被《medline数据库》收录，1篇发表在中国科技论文统计源期刊，1篇文章已被SCI杂志接收（Chinese Medical Journal）。本课题尚未发表的研究成果预计可以发表2-3篇SCI杂志文章。目前正在申请国家发明方法专利一项。