WAVE1在上皮性卵巢癌恶性侵袭行为中的作用及机制研究

Ovarian cancer (OC) is a common gynaecological malignancy associated with poor outcome. Our previous study using the innovative reverse capture antibody microarray to identify autoantibody biomarkers in the plasma samples of epithelial OC (EOC) patients suggested a significantly elevated expression of WAVE1 in EOC plasma compared with healthy controls. And then we found that up-regulated WAVE1 expression is associated with an unfavorable prognosis and is an independent prognostic factor for EOC, which suggests that WAVE1 may be a novel and crucial predictor for EOC metastasis. In the present study, we aim to investigate the mechanisms in oncogenesis and metastasis of EOC that are caused by WAVE1 overexpression. There are four steps in our study: 1. The cell biology and molecular biology changes after knockdown WAVE1 of SKOV3 and OVCAR-3 cells will be examined; 2. The interaction and combining site of Abl, Abi-1, and WAVE1 will be investigated, and the role of Abl-Abi-1-WAVE1 signaling pathway activating WAVE1 in oncogenesis will also be analyzed; 3. The molecular mechanism of WAVE1 in oncogenesis and tumor metastasis will be studied in nude mice; 4. Finally, the efficiency of WAVE1 auto-antibody alone and combination with CA125 in EOC will tested to increase the specificity and sensitivity of CA125 for the early detection. We wish to investigate the role of WAVE1 in EOC, and provide a novel/crucial predictor and therapy for oncogenesis and metastasis in EOC.

卵巢癌是常见的具有不良预后的妇科恶性肿瘤之一。课题组前期研究采用反向捕获抗体芯片技术发现上皮性卵巢癌（EOC）患者血清中存在WAVE1自身抗体，经验证WAVE1蛋白与EOC发展侵袭相关。本项目拟通过构建WAVE1沉默型EOC细胞株，检测干扰WAVE1后对EOC细胞的生物学特征的影响；研究Abl、Abi1和WAVE1蛋白的相互作用、结合位点，探讨Abl-Abi1-WAVE1信号转导通路激活WAVE1，从而影响EOC发展和侵袭行为；构建裸鼠移植瘤、转移瘤模型，在体内进一步验证WAVE1促进EOC发展侵袭能力的分子机制；最后通过临床检测EOC患者血清中WAVE1自身抗体联合CA125的检测效率等四部分研究，以期阐明WAVE1在EOC发展侵袭恶性行为中的作用机制这一科学问题，初步证实WAVE1自身抗体可能作为新的EOC早期诊断指标的临床应用意义，为EOC早期诊断和治疗寻找新的靶点和切入点。

卵巢癌是常见的具有不良预后的妇科恶性肿瘤之一。课题组前期研究采用反向捕获抗体芯片技术发现上皮性卵巢癌（ EOC）患者血清中存在 WAVE1 自身抗体， 经验证 WAVE1蛋白与 EOC 发展侵袭相关。本项目检测了 WAVE1 及其上游信号分子 c-Abl 、 Rac1 和 ABi1 在不同卵巢组织中的蛋白及 mRNA 表达, 发现上述蛋白及mRNA在EOC中高表达，差异均具有统计学意义。通过利用 RNA 干扰技术下调 WAVE1、 c-Abl、 Rac1基因表达后，发现对卵巢癌细胞生长、增殖、粘附和侵袭等恶性生物学行为均受到抑制。 为了在体内进一步验证 WAVE1 、 c-Abl、 Rac1 基因促进 EOC 发展侵袭能力的分子机制，我们通过构建裸鼠移植瘤瘤模型，发现抑制上述基因表达后裸鼠体内成瘤率及成瘤体积均明显下降（P＜0.05）；最后我们检测了上述基因沉默前后卵巢癌细胞中与增殖 、侵袭转移相关信号转导通路蛋白表达水平变化，发现WAVE1、 c-Abl 可能是通过调节 PI3K-AKT、 p38MAPK 信号通路，导致 MMP-2、 MMP-9、E-cadherin 和 cyclin.D1 蛋白表达水平发生改变从而抑制了卵巢癌细胞增殖、侵袭、粘附、转移等生物学功能。而Rac1 可能通过 Rac1/pak1 和 p38MAPK 信号通路调节 E-cadherin 的表达，从而引起卵巢癌细胞 EMT的改变。进一步探讨了WAVE1及其上游信号分子在 EOC 发展侵袭恶性行为中的作用机制这一科学问题，以期为 EOC 早期诊断和治疗寻找新的靶点和切入点。