中国野生葡萄PR10蛋白功能及抗病原真菌活性分析

葡萄白粉病、炭疽病等是严重危害欧洲葡萄生产的世界性真菌病害。本项目根据前期研究已获得的中国野生葡萄病程相关蛋白VpPR10（pathogenesis related protein 10）全长基因序列（登录号：DQ336289），运用重叠延伸PCR方法对VpPR10蛋白中三个与RNAase活性和抗真菌活性有关的保守氨基酸残基（lys55、glu149 和tyr151）进行点突变，分别替换为asn55、gly149和his151；构建野生型和突变型VpPR10蛋白原核表达载体，表达、纯化目的蛋白，体外进行核糖核酸酶活性和抗真菌活性分析；并进一步用异硫氰酸荧光素（Flurescein isothiocyanate,FITC）标记野生型和突变型VpPR10蛋白，确定其在葡萄病原真菌菌丝体细胞中位置，分析VpPR10蛋白质结构与功能的关系，为最终弄清VpPR10基因的功能提供理论依据。