抗真菌新药艾迪康唑手性代谢分析及其代谢产物制备技术研究

本课题选用艾迪康唑为研究对象，评价皮肤和口服给药后的立体选择性代谢特征，建立以HSCCC技术为主的代谢产物制备技术和以分析型-制备型手性液相色谱线性放大为主的对映体制备技术，详细阐明艾迪康唑体内立体选择性代谢途径及产物结构，弄清立体选择性代谢发生的I相及II相分子酶学机制，比较不同给药途径下的立体选择性代谢特征，从而初步建立手性药物体内代谢定性定量分析-代谢物组制备鉴定-立体选择性代谢分子酶学机制的三唑类抗真菌创新药物手性药物代谢动力学研究技术平台。

本课题以抗真菌新药艾迪康唑为研究对象，开展其立体选择性代谢动力学研究，并对体内代谢产物进行制备。建立了分析型-半制备型手性液相色谱技术拆分及制备艾迪康唑对映体，为对映体定量提供对照品；建立了毛细管电泳-在线场放大技术定量分析生物样品中艾迪康唑对映体，研究艾迪康唑Beagle犬体内立体选择性药代动力学；建立了LC-MS定性鉴识-大孔吸附树脂/制备液相色谱技术分离制备艾迪康唑代谢产物，探讨其代谢途径；建立了微透析在体取样技术，研究皮肤给药艾迪康唑乳剂后体内药动学与体外药效学特点。结果显示直链淀粉AD柱适合于艾迪康唑对映体的拆分及制备。0.25%羟丙基-β-环糊精，背景电解质溶液为25 mM磷酸二氢钠–6.25 mM硼砂(pH 2.5)的条件下艾迪康唑对映体得到了基线分离，添加了80%乙腈的在线场放大技术可以提高血浆中艾迪康唑对映体的检测，LLOQ为2.5ng/ml，Beagle犬口服消旋体艾迪康唑20mg/Kg后体内左旋艾迪康唑血药浓度数据较高，右旋艾迪康唑血浆浓度较低，每个时间点上l-艾迪康唑/r-艾迪康唑的比值大部分在1.1-1.6之间，显示出艾迪康唑进入体内后具有立体选择性处置过程。大鼠给药艾迪康唑后的尿液样品的LC-MS结果提示，艾迪康唑的代谢产物主要有5个，在定性鉴识基础上，采用制备液相色谱对其中含量较高的3-N-[去甲基，去（4-碘苯甲基）]艾迪康唑和3-N-去（4-碘苯甲基）艾迪康唑进行制备研究。采用微透析取样后的皮肤组织和血浆透析液进行真菌生长抑制率研究，发现大鼠局部给药后900min内收集的所有皮肤组织的微透析液均对所研究的12种真菌具有较强的生长抑制率；而血浆透析液对真菌抑制率较低，10h后所收集的透析液对某些真菌生长抑制低于50%。上述结果真实的反映了给药后体内艾迪康唑浓度与时间的关系、浓度与抗真菌活性的关系。