树突状细胞IL-6高分泌状态在SLE免疫发病机制中的作用研究

Systemic lupus erythromatosus (SLE) is an autoimmune disease. As the controller of immune responses, DC's role in the pathogenesis of autoimmune diseases has been heavily investigated.In our previous studies, we found that DCs of lupus mice produced increased levels of IL-6 in contrast to those from normal strain of mice, and SLE DC significantly reduced the immunosupressive function of regulatory T cells via IL-6. Furthermore, we discovered that DCs of lupus mice drastically promoted the production of immunoglobulin from B cells. The recent discovery of T follicular helper cells (Tfh) provides a new clue to unravel the immunopathogenesis of SLE.Tfh is a type of T cell uniquely located in the follicles where there are abundant B cells. This anatomic location of Tfh largely facilitates B cell antibdoy development. It is known that IL-6 is a critical cytokine regulating Tfh differentiation.Thus, we hypothesize in this proposal that SLE DCs promote autoimmune Tfh development through secreting high-level IL-6, and subsequently, Tfh cells enhance the production of autoantibodies participating in SLE pathological process. To test this hypothesis, we will employ a lupus mouse model (sle1-3 tripple congenic mice) as well as SLE patients to study the effect of DC and its product IL-6 on Tfh differentiation as well as B cell antibody production.The ultimate goal of this study is to establish the role of DCs in SLE pathogenesis and to develop new therapeutic approaches for SLE.

系统性红斑狼（SLE）是一种自身免疫性疾病。做为免疫调节的枢纽-树突状细胞（DC）近年来是自身免疫病领域的研究热点之一。我们研究发现SLE鼠的DC较正常鼠分泌更高水平的IL-6,而IL-6可使调节性T细胞的免疫抑制作用受到严重影响。我们的进一步研究发现狼疮鼠DC可以直接作用于B细胞促进免疫球蛋白的产生。近年来滤泡辅助T细胞(Tfh)的发现为进一步揭示SLE的免疫发病机制提供了新的线索。Tfh细胞是唯一定位于B细胞区而调节B细胞抗体形成的T细胞，而Tfh细胞的关键调节因子为IL-6。因此，我们设想：SLE的DC通过分泌高水平的IL-6在DC-T细胞的相互作用过程中促进自身反应性Tfh的分化。Tfh进而促进B细胞自身抗体的产生。本课题中我们将采用SLE小鼠模型及SLE患者为研究对象对DC在Tfh分化及B细胞抗体产生过程中的作用进行探讨，以明确DC及其分泌的高水平IL-6在SLE发病中的作用。

近年来，具有负向调节机体免疫反应的髓系来源的抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSC)被广泛研究。其中研究最多的是在肿瘤领域，因其抑制T细胞对肿瘤的免疫而促进了肿瘤的发展。而在自身免疫性疾病中，MDSC抑制了自身免疫应答，限制了慢性炎症，减轻了组织损伤。MDSC发挥免疫抑制功能的机制主要是诱导性一氧化氮合成酶（iNOS）的高表达。众所周知，系统性红斑狼疮(SLE）是一种累及全身多系统器官组织的自身免疫性疾病, 血清中存在多种自身抗体, 目前病因尚不完全清楚。在本研究中，我们采用Pristane诱导的狼疮小鼠模型，流式分选出Pristane注射后2周的小鼠腹腔中的 CD11b+Ly6Chi的单核细胞，将其和BALB／c小鼠的CFSE染色的脾细胞混合培养，流式检测脾细胞的增殖情况。并且在培养体系中加入iNOS抑制剂和吲哚美辛，观察对增殖的影响。体外研究表明，CD11b+Ly6Chi的单核细胞可以极大的抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖。而iNOS抑制剂和吲哚美辛可以逆转对T细胞的抑制作用。而且，transwell培养证实了单核细胞对T细胞的抑制作用是依赖细胞接触的。同时，结果显示，单核细胞可以诱导调节性T细胞（Treg）的生成，促使抑制性因子IL-10的分泌，下调IFN-γ的分泌。本研究结果证实，在Pristane诱导的狼疮小鼠模型中，具有CD11b+Ly6Chi表型的单核细胞是一群具有免疫抑制活性的MDSC，通过抑制T细胞对自身抗原的免疫应答，很可能在疾病的发展中起到了保护作用，和先前报道的这群细胞通过分泌I型IFN促进SLE疾病的发展是不一致的。在自身免疫性疾病中，MDSC有望成为一个新颖的治疗靶点。