糖调节蛋白78诱导耐受性DC形成的研究

树突状细胞在免疫调节中扮演着免疫应答和免疫耐受的双重角色，如何诱导耐受性DC的形成、从而诱导免疫耐受是研究热点。课题组前期工作提示，增加糖调节蛋白78(Grp78)在胰岛β细胞的表达不仅可以保护细胞抵抗凋亡，还可诱导免疫负调细胞的形成，参与免疫调节。而细胞在应激状态下亦可高表达Grp78，不仅限于胞内，还可分泌Grp78至胞外微环境中，调节内皮细胞及DC的功能。但Grp78调节免疫功能的作用机制尚不清楚。本课题拟在前期研究工作的基础上，体外研究分泌型Grp78对耐受性DC、Tregs的诱导分化作用，寻找Grp78在DC细胞膜表面的结合受体；体内研究Grp78输注以及Grp78诱导的耐受性DC输注对小鼠皮肤移植物存活的的影响，明确Grp78是否参与诱导移植耐受，为体内外诱导耐受性DC的形成、从而诱导免疫耐受治疗自身免疫性疾病、超敏反应以及研究肿瘤免疫逃逸机制等提供科学的理论基础与实验数据。

背景：树突状细胞在免疫调节中扮演着免疫应答和免疫耐受的双重角色。如何诱导耐受性DC的形成、从而诱导免疫耐受是研究热点。细胞在应激状态下可高表达Grp78，不仅限于胞内，还可分泌Grp78至胞外微环境中，调节内皮细胞及DC的功能。但Grp78调节免疫功能的作用机制尚不清楚。.方向：体内外研究Grp78诱导的DC的免疫调节功能。.主要内容：体外研究分泌型Grp78对耐受性DC的诱导分化作用，寻找Grp78在DC细胞膜表面的结合受体；体内研究Grp78诱导的耐受性DC输注对NOD小鼠病程的影响，.重要结果：Grp78可以保护细胞抵抗凋亡；分泌型Grp78能诱导耐受性DC的形成，该tDC能通过诱导调节性T细胞的形成、抑制T细胞增殖、促进T细胞凋亡的方式参与免疫调节；Grp78与DC、BMDC细胞膜的结合与TLR2有关。.关键数据：Grp78作为一种应激性蛋白，处于缺氧、营养剥夺、酸中毒等微环境中的实体瘤细胞能上调其表达，在胞内通过抑制caspase-3的活化保护细胞抵抗凋亡，介导肝癌细胞系HepG2细胞抵抗化疗药物顺铂诱导的凋亡；survivin的干扰会导致Grp78的表达上调，从而部分抵消survivin siRNA的促凋亡作用，survivin+Grp78联合干扰诱导肿瘤细胞凋亡的效果优于survivin或Grp78的单基因干扰。应激分泌至细胞外微环境中的Grp78能诱导小鼠骨髓来源的单核细胞(BMDC)分化为耐受性DC(tDCs)，与immDC相比，该tDCs的功能更稳定。Grp78处理的tDCs能诱导耐受性T细胞(Treg)的形成，抑制T细胞增殖，促进T细胞的凋亡，从而发挥免疫调节作用。GST Pulldown初步结果显示Grp78在DC细胞膜表面的结合受体为TLR2。.科学意义：明确Grp78参与诱导免疫耐受，为体内外诱导耐受性DC的形成、从而诱导免疫耐受治疗自身免疫性疾病、超敏反应以及研究肿瘤免疫逃逸机制等打下基础。