CD4分子遗传多样性与山羊精子结合外源DNA能力存在品种差异的关系研究

哺乳动物精子具有自发结合外源DNA的能力，精子介导基因转移是转基因效率较高的技术方法之一，但同时存在着极大的随机性和不确定性。DNA 的内化转运受到精子质膜分子的严格调控，仅有少量结合DNA能被内化转运到精子细胞核，极大的降低了精子介导基因转移效率。我们前期研究发现精子供体对精子载体法制备转基因动物有显著影响，并发现不同品种的山羊精子结合内化外源DNA能力存在显著差异。本课题从精子内化外源DNA能力存在品种差异入手，以精子质膜上的转运系统之一CD4分子为研究对象，研究山羊精子CD4基因遗传多样性，定量分析精母细胞中CD4 mRNA，精子膜上CD4蛋白的定位、分布及差异表达，并与精子内化外源DNA能力进行相关性分析，探索产生品种差异的分子机制。为高内化转运能力精子供体的筛选以及人工干预提高外源DNA的内化转运提供理论依据和实践指导，最终为建立简单、稳定、高效的精子介导转基因方法学奠定基础。