捻转血矛线虫半胱氨蛋白酶新基因Hc58生物学特性研究

捻转血矛线虫是寄生线虫的模式动物。捻转血矛线虫半胱氨蛋白酶基因Hc58是本课题组最近克隆的新基因，序列分析和比较研究发现该酶不同于已经发现的同种虫体的同类酶。本研究拟通过对该基因的体外表达和对天然蛋白的纯化，测定该酶的酶活性、观察该酶对宿主血红蛋白和组织基质的水解，探索该酶在虫体消化吸收中的作用。通过研究该酶对宿主抗体的水解和抗凝血作用以及对宿主T细胞转化效率的影响，探索该酶参与寄生虫免疫逃避的可能性。通过动物免疫试验，观察该酶作为抗捻转血矛线虫疫苗候选抗原的可行性。通过实时PCR等分子生物学方法测定该酶在第1期、第2期、第3期、第4期幼虫和成虫的表达情况，确定该酶的阶段性表达。通过原位杂交和免疫组织化学方法观察该酶在虫体不同组织中的分布，确定该酶的组织定位。从而阐明该酶的生物学特性和生物学功能，对探索寄生线虫侵入宿主机制、消化道附着机制、吸血机制和免疫逃避机制等具有重要意义。