小干扰RNA抑制树突瘤苗IL-10受体后对食管癌细胞免疫效应的作用和机制研究

Esophageal cancer is one of the most common fatal cancers in China，the 5-year survival rate is only about 10%. DC vaccine is one of the most promising methods of cancer treatment, but the traditional vaccine effect is poor, the reason may be related to its differentiation inhibition. Firstly,we will determine whether DC differentiation is more mature by detecting cell phenotype and factors when DC IL-10 receptor (IL-10R)was knocked down.Secondly,the antitumor activity and mechanism of IL-10R silenced tumor vaccine against esophageal cancer was analyzed by mixed lymphocyte reaction, CTL killing activity assay and IFN-γ detection. Finally，we will estimate targeted tumor vaccine in vivo anti-tumor activity through the experiment of tumor bearing nude mice. This study provides a new idea and experimental basis for the development of a new type and highly effective esophageal cancer DC vaccine, which is of great theoretical significance to further improve the curative effect of esophageal cancer.

食管癌是我国最常见的致死性癌症之一，5年生存率仅为10%左右。DC瘤苗是目前最具前景的肿瘤治疗方式之一，但传统瘤苗效果欠佳，原因可能与其分化抑制有关。本课题：1.通过研究IL-10受体（IL-10R）敲减后DC表型及相关细胞因子检测了解IL-10R敲减后的DC是否分化更为成熟。2.通过混合淋巴细胞反应、CTL杀伤活性检测及IFN-γ检测等实验，了解IL-10R敲减后的DC瘤苗体外抗食管癌免疫活性及其分子机制。3.通过荷瘤裸鼠实验验证IL-10R敲减后DC瘤苗体内抗食管癌免疫活性。本课题为开发新型高效食管癌DC瘤苗提供了新思路和实验依据，对进一步提高食管癌疗效具有重要理论意义。

食管癌是我国最常见的致死性癌症之一，5年生存率仅为10%左右。IL-10是免疫抑制作用比较强的一种免疫因子，几乎所有的树突状细胞（DC）和单核巨噬细胞都是IL-10抑制性作用的靶细胞，其中DC是一种骨髓来源的T和B细胞免疫反应的关键调控者，也是起劲为止发现的最高效的抗原呈递细胞。因此，揭示IL-10在食管癌中的分子机制对于阐明食管癌的发展机制，为临床免疫治疗提供实验基础和理论依据意义重大。本项目中我们发现，IL-10R敲除后的DC细胞与CTL共培养并进行了体内及体外实验，发现较正常DC细胞激活的CTL对食管癌细胞的杀伤效果未见显著增高，为保证本课题能够真正得出对食管癌治疗及作用机制有价值的阳性实验结果，我们对CTL共培养的食管癌细胞致癌基因进行检测，发现c-myc表达下调，有报道表明EMS是c-myc的上游调控lncRNA。 进一步研究发现低氧能够显著诱导食管癌中EMS的表达并促进食管肿瘤细胞的DDP耐药性。分子机制研究发现，lncRNA EMS可作为ceRNA竞争性结合miR-785-3p调控WTAP的表达，进而经WTAP调控食管癌细胞对DDP的敏感性并抑制IL-10的表达。本研究也从肿瘤免疫的角度探讨IL-10与食管癌DDP耐药的相关性，这将为食管癌后续的临床免疫治疗开辟一条新的思路。