巨噬细胞的极化改变在RA发生和发展中的作用及其调控机制研究

Rheumatoid arthritis is a common autoimmune disease that characterized by synovial inflammation and hyperplasia ("swelling"). As immunocyte, Macrophages play a pivotal role in RA because they involved in development and progression. Recently, Several studies and our preliminary study support Macrophages appear to show various polarized phenotype and function in different stage.But the development,mechanism,impact factor and significance of macrophages polarization in RA have not been fully uncovered. The aim of this study is to test the following research on clinical case and rabbit model of antigen-induced rheumatoid arthritis by flow cytometry , confocal laser scan microscopy, gene arrays and deep sequencing technology：① We would estimate the changes of polarized phenotype,function,CKs and CKR,miR,interferon regulatory factor(IRF) of macrophage in development of RA and regulatory mechanism;②evaluate the significance of change on macrophage polarization in development and progression of RA ;③discuss the influence of miR and IRF on macrophage polarization , in addition on development and progression of RA;④valuation the impact of body immunity and redox state on macrophage polarization ,also on development and progression of RA. It is expected to roundly understand the changes and significance of MΦ in development and progression of RA and deeply comprehend the mechanism of RA.We hope it can provide important theoretical significance for further clarifing the pathogenesis of RA and understanding the rule of occurrence and development of RA.

类风湿性关节炎（RA）是以关节滑膜炎为特征的自身免疫性疾病，巨噬细胞（MΦ）作为一种免疫细胞参与了RA的发生和发展。近期报道及我们的前期研究显示，在RA的不同阶段MΦ可能存在表型和功能的极化改变，但其极化过程的演变、机制、影响因素及意义不明。本课题拟通过临床病例和构建兔RA模型，结合流式细胞术、激光共聚焦、基因芯片和深度测序等技术，系统深入地探讨：①RA进展不同阶段MΦ表型、功能、CKs和CKR表达谱、miR表达谱、干扰素调节因子（IRF）等的改变及其相关机制；②MΦ极化改变对RA进展的意义；③miR和IRF对MΦ极化及RA进展的影响；④机体免疫及氧化还原状态对MΦ极化和RA进展的影响。以期较全面地了解MΦ在RA进展过程中的变化和意义，更深入地理解RA发生和发展的机制，对进一步阐明RA的发病机制、加深对RA发生和发展规律的认识具有重要的理论意义。

单核-巨噬细胞参与了类风湿关节炎（RA）的炎症启动和维持过程，其功能状态及其与其它免疫细胞间的相互作用在类风湿关节炎的发生、发展中发挥着重要作用，明确RA发生发展过程中巨噬细胞的极化改变、以及其与其它免疫细胞间的相互作用对于我们进一步了解类风湿关节炎的发生发展机制具有重要意义。本项目首先通过与骨性关节炎（OA）患者关节腔积液中的巨噬细胞进行比较，检测了RA患者关节腔积液中巨噬细胞的极化状态，结果显示RA患者关节腔积液中的单核巨噬细胞表现为经典的M1表型（CD163表达下调，HLA-DR表达上调），而且研究发现RA患者关节腔积液中单核巨噬细胞表面M1分子的表达水平与相应患者的疾病严重程度密切相关，提示M1型巨噬细胞可能参与了RA患者的滑膜损伤。随后，我们进一步探讨了RA患者外周血中单核细胞的极化表型与功能，结果显示：与OA患者比较，RA患者外周血中单核细胞表面M1分子（CD40、CD64、HLA-DR）和M2分子（CD163、CD206）的表达显著上调，呈现M1与M2混合型；与健康体检者比较，RA患者外周血中单核细胞表面M1分子（CD64）的表达显著上调，提示RA患者全身的单核巨噬细胞系统主要以M1表型为主，可能与RA患者的炎症维持相关。在此基础上，本项目初步探讨了单核巨噬细胞的极化状态与其它免疫细胞功能状态的关系，结果显示RA患者外调血中CD4+T、CD8+T淋巴细胞和中性粒细胞表面PD1、TIGIT等共刺激分子的表达显著升高，且与疾病的严重程度相关。本研究系统地探讨了巨噬细胞极化改变、T淋巴细胞和中性粒细胞共刺激分子改变对类风湿关节炎的影响。