铜绿假单菌生物被膜密度感应系统酰化高丝氨酸内酯信号分子干预机制

气管插管治疗中导管相关性感染是围产儿临床上棘手的问题。铜绿假单胞菌是极为常见的病原菌，它易形成生物膜（biofilm,BF）,是导致这类感染难治性和细菌耐药性增加的主要原因。密度感应系统(Quorum-sensing,QS)对铜绿假单胞菌BF及细菌耐药性增加有重要作用。本课题组前期实验证实氨溴索可破坏铜绿假单胞菌BF的结构，可影响藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA及它们所编码的酶的表达和活性。在此基础上，研究氨溴索对铜绿假单胞菌BF 的QS系统的干预作用，检测其对QS系统所控制的致病因子的影响。进一步探讨作用机制，研究氨溴索对QS信号分子-酰化高丝氨酸内酯（AHL）表达的影响，检测其对编码AHL合成酶的基因rhlI 和lasI和编码致病因子的基因lasB和rhlA转录的影响。通过已成功建立的导管相关性BF动物模型，研究氨溴索对QS的体内干预作用。

气管插管治疗中导管相关性感染是围产儿临床上棘手的问题。铜绿假单胞菌是极为常见的病原菌，它易形成生物膜（biofilm,BF）, 是导致这类感染难治性和细菌耐药性增加的主要原因。密度感应系统(Quorum-sensing,QS) 对铜绿假单胞菌BF及细菌耐药性增加有重要作用。本课题组前期实验证实氨溴索可破坏铜绿假单胞菌BF的结构，可影响藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA及它们所编码的酶的表达和活性。在此基础上，本研究探讨了氨溴索对铜绿假单胞菌BF的QS系统的干预作用，检测了其对QS系统所控制的致病因子的影响。进一步探讨了其作用机制，研究了氨溴索对QS信号分子-酰化高丝氨酸内酯（AHL ）表达的影响，检测其对编码AHL 合成酶的基因rhlI 和lasI和编码致病因子的基因lasB和rhlA转录的影响。通过已成功建立的导管相关性BF动物模型，本研究还探讨了氨溴索对QS的体内干预作用。本研究结果证实：1.氨溴索对铜绿假单胞菌的生长无明显影响；2.氨溴索能够减少铜绿假单胞菌的早期黏附，降低铜绿假单胞菌的运动能力；3.氨溴索可以下调铜绿假单胞菌BF QS 系统中信号分子 AHL合成酶编码基因lasI和rhlI mRNA的表达，降低信号分子AHL的表达来抑制BF；4.氨溴索可以下调铜绿假单胞菌BF QS 系统中毒力因子编码基因toxA , rhlA，lasB，aprA mRNA的表达。氨溴索作用后，毒力因子外毒素A 、弹性蛋白酶、鼠李糖脂、绿脓菌素浓度及碱性蛋白酶活性均出现不同程度的降低；5.氨溴索可破坏气管插管上BF的结构，减轻肺部病理变化。氨溴索可以降低体内导管上BF QS系统中信号分子 AHL合成酶编码基因lasI和rhlI mRNA以及信号分子AHL的表达；6.氨溴索可降低体内肺组织匀浆中各种毒力因子的含量，减轻毒力因子引起的炎症反应，降低BF的致病性。