tvb基因突变致宿主抗B亚群禽白血病病毒感染的机制研究

A cellular receptor encoding by the chicken tvb locusis is essential for infection of avian cells by subgroups B avian leukosis viruses (ALV-B). We identified two new alleles of tvb related with resistance to infection by ALV-B. Nonsense mutationc.298C>T was found in one resistant allele, and frame shift mutationc.361insA in the other. To better understand the mechanism of resistance to viral infection induced by mutations in tvb, expression, structure and subcellular localizationof mutant proteins will be detected firstly; then binding affinity of virus for mutant TVB receptors and infectivity of cells with a mutant-type tvb allele will also be determined. Furthermore，a method to distinguish between the resistance and susceptibility alleles of tvb will be estabilished, and association of resistant variation with economic trait in chicken will be analyzed for evaluation of values in resistance breeding. The results of our study will provide a theoretical basis and technical support for breeding for avian leucosis resistance in chicken.

tvb基因编码的受体蛋白是介导B亚群禽白血病病毒感染宿主细胞的关键。我们发现2个tvb基因新突变位点c.298C>T和c.361insA，两种突变分别为无义突变和移码突变，均能引发宿主产生B亚群禽白血病病毒抗性。本项目拟通过研究两种基因突变对tvb基因转录、翻译以及受体蛋白结构、表达定位、病毒亲和力以及侵染力的影响，从而有效揭示tvb基因突变致使宿主抗B亚群禽白血病病毒感染的机制；同时，通过建立tvb抗性位点分子诊断技术，研究B亚群禽白血病抗性与鸡重要经济性状的关系，评价tvb抗性位点的抗病育种价值；为我国优质肉鸡抗病育种提供科学理论基础，为禽白血病防控新策略提供技术支持。

tvb基因编码的受体蛋白是介导B亚群禽白血病病毒感染宿主细胞的关键。我们发现2个tvb基因新突变位点c.298C>T（tvbr3）和c.361insA（tvbr4），两种突变分别为无义突变和移码突变，均能引发宿主产生B亚群禽白血病病毒抗性。本项目通过原核表达发现两种突变均可导致tvb受体蛋白截短，利用间接免疫荧光技术研究发现两种突变不影响tvb在细胞膜上的表达定位，通过构建荧光标记重组病毒，并通过体外细胞攻毒试验和荧光检测发现，两种突变型细胞与病毒亲和力显著低于野生型细胞，由此揭示tvb基因突变致使宿主抗B亚群禽白血病病毒感染的机制；同时，建立了tvb抗性位点分子诊断技术，通过位点与性状关联分析发现，tvb抗性型（tvbr3/r3和tvbr4/r4）个体与敏感型（tvbs1/s1）个体的上市体重和料比之间没有明显差异，tvb抗性选择对生长性能没有明显的不利影响，但对在一定程度上降低胸肌率，而抗性选择更有利于免疫器官发育。本项目研究为我国优质肉鸡抗病育种提供科学理论基础，为禽白血病防控新策略提供技术支持。