海带模式转化系统的建立以及转藻胆蛋白基因海带的培育

大型海藻基因工程缺乏可借鉴的模式，难点在于对载体（启动子）、方法、筛选标记等缺乏研究。海带的难点还在于细胞和原生质体培养不成功，组织培养效率较低。在本青年基金课题资助下，研究两种启动子，比较了两种透壁转化方法试验了海带对7种抗生素的敏感性，特别是以雌配子体为受体、孤雌生殖为再生路线，建立了一个（SV40启动子+基因枪方法+氯霉素选择压力）的遗传转化模式。另外还发现CaMV35S启动子在海带中具有组织表达特异性；海带对潮霉素比对氯霉青更敏感，潮霉素的LD50与海带长度不相关，而氯霉素LD50相关。利用该模型获得了LacZ和cat在孤雌再生海带中的稳定表达。将螺旋藻藻胆蛋白基因克隆于SV40启动子、cat下游，转化后经筛选获得转藻胆蛋白基因海带。