Wntless对少突胶质细胞的分化及髓鞘化的功能研究

少突胶质细胞是中枢神经系统的髓鞘形成细胞，对神经动作电位的传导具有重要的作用。目前Wnt信号通路对少突胶质细胞发育的调控引起很多学者的关注，但是已有的一些研究结果间相互矛盾。Wntless是一个与Wnt信号通路相互促进的Wnt配体运输蛋白。我们研究发现，Wntless在少突胶质细胞中有表达，提示其在少突胶质细胞中有重要作用。我们将采用Cre-Loxp基因条件敲除系统将小鼠少突胶质细胞中的Wntless基因在特定时期敲除，并结合体外实验研究Wntless这一Wnt信号通路关键蛋白在少突胶质细胞特定发育时期的功能，阐明Wnt信号通路对少突胶质细胞发育和髓鞘化过程的分子调控机制，为少突胶质细胞发育缺陷或再生不足引起的疾病研究提供新的思路。

Wnt/β-Catenin信号通路受到多重调控。没有WNT蛋白时，β-Catenin容易被AXIN、GSK3β及APC等蛋白形成的“降解复合体”磷酸化，从而进入泛素化降解通路，当WNT蛋白与其受体结合时，“降解复合体”受到抑制，β-Catenin能够在核内富集，与TCF/LEF家族转录因子结合促进靶基因的转录。Wnt/β-Catenin信号通路的靶基因包括Wntless和Axin2这两个正负反馈因子，其中Wntless能够促进WNT蛋白的分泌，而Axin2则导致β-Catenin降解。. . Wnt/β-Catenin信号通路对少突胶质细胞发育的调控功能存在争议，部分论文的研究结果表明Wnt/β-Catenin信号通路能够抑制少突胶质细胞的分化，但也有部分研究论文显示Wnt/β-Catenin信号通路能够促进少突胶质细胞的分化。为了阐明Wnt/β-Catenin信号通路对少突胶质细胞发育的影响，我们首先尝试用Wntless条件性基因敲除小鼠来检验少突胶质细胞发育的变化，但我们通过不同时期敲除少突胶质细胞中的Wntless基因，发现对少突胶质细胞发育的影响较小。这可能由于Wntless的WNT分子旁分泌的影响。于是我们调整策略，选择Wnt/β-Catenin信号通路的其它基因敲除或激活小鼠研究少突胶质细胞的发育。通过表达稳定形式的β-Catenin、敲除Axin2以及敲除β-Catenin，我们的研究发现，激活Wnt/β-Catenin信号通路能够抑制少突胶质细胞前体的生成，这种抑制作用存在剂量效应；而敲除β-Catenin则使少突胶质细胞前体的生成提前，但少突胶质细胞前体的分化却推迟。我们的研究结果表明Wnt/β-Catenin信号通路在少突胶质细胞发育的不同时期具有不同的作用。. . 在本次基金资助下，我们已经发表了一篇Journal of Neuroscience论文，一篇Biotechnology & Biotechnological Equipment论文，另有一篇Neuroscience Bulletin论文处于修改阶段。