硒干预降低氧化应激水平治疗自身免疫甲状腺炎免疫机制的研究

Autoimmune thyroiditis (AIT) is a common organ specific autoimmune disease. What we can do for it is levothyroxine replacement therapy to maintain thyroid function normal. But still, high levels of TPOAb and inflammation do exist in thyroid without any effective intervention methods. Recently, several studies in the world including the work we did previously demonstrated that selenium intervention in AIT patients can decrease TPOAb titers. But the mechanism of how Se works is still unclear. Some in vivo and in vitro studis have demonstrated that oxidative stress play an important role in the maturation of APC and the process of antigen presentation. We will do some research in vitro to investigate how selenium play the roles on the maturation of dendrtic cell(DC), DC-T cell communication and CD4+T cell polarization in AIT patients. And another in vitro research to investagate the mechanism of action of se on adhesion molecules expression and cytokine secretion in the human thyrocytes. The molecular mechanism of how Se works on NF-κB expression through reducing ROS is what we attempt to identify, also, some further research in vivo will be put into act to verify the immunological mechanism of selenium on the model of spontaneous autoimmune thyroiditis.

自身免疫性甲状腺炎(AIT)是一种常见的自身免疫病。通常替代治疗可以使甲状腺功能维持正常，但对于高水平的甲状腺自身抗体及甲状腺局部炎症缺乏有效的干预方法。近年来国际上及本研究组所做的一些研究显示硒干预可以使AIT患者自身抗体下降。但硒治疗AIT的免疫机制始终没有被阐明。最近的研究表明氧化应激在APCs活化及抗原递呈过程中扮演着重要的角色。本研究将以AIT患者为研究对象，进行体外实验研究，探讨硒干预降低活性氧(ROS)水平从而作用于树突状细胞(DC)的成熟、DC-T细胞抗原递呈及TH极化中的机制，探讨 IFN-γ诱导Treg凋亡时ROS的作用及硒对其调节机制，以及探讨硒通过下调ROS抑制炎症状态下甲状腺细胞表面粘附分子表达和细胞因子分泌的作用机制，确定硒通过降低ROS干预NF-κB表达的分子机制。此外通过硒干预自发甲状腺炎小鼠模型进一步验证硒通过下调ROS抑制AIT自身炎症的免疫机制。

有临床研究发现硒可以治疗自身免疫甲状腺炎(AIT)，但是其免疫机制没有被阐明。本研究首次从硒通过降低活性氧(ROS)水平降低抗原递呈过程的角度去探讨其治疗AIT的免疫机制。首先在临床AIT患者中研究表明，Th22及Th17细胞在AIT发病中占有重要的作用。然后进行小鼠体内实验，6周龄NOD.H-2h4小鼠被随机分为四组：对照组、AIT组(高碘水喂养)、Se1组(高碘水与1 mg/kg含硒饲料)、Se2.5组(高碘水与2.5 mg/kg含硒饲料)。12周后，测定甲状腺局部炎症，血清TGAb水平，脾脏树突状细胞成熟，及Th17及Th1细胞比例。然后以健康自愿者及AIT患者为研究对象，进行体外实验。在Mo-DC成熟的过程中，给予亚硒酸钠或抗氧化剂NAC干预，观察Mo-DC表面共刺激分子及HLA-DR表达，检测胞内ROS水平和NF-κB激活，混合淋巴细胞反应(MLR)检测CD4+T细胞增殖的能力及其分泌IL-6和IL-17的水平。体内试验中，与AIT组相比，Se2.5组可以显著减轻甲状腺局部淋巴细胞浸润，降低血清TGAb水平，同时CD11c+树突状细胞表面CD80及CD86水平降低，Th17细胞比例降低。体外实验中，亚硒酸钠或NAC干预抑制Mo-DC成熟过程中ROS水平提高，并抑制NF-κB的激活，抑制程度与硒干预浓度成正比。在MLR中，10μM亚硒酸钠或2mM NAC干预后的Mo-DC刺激CD4T细胞增殖能力及其分泌IL-6及IL-17的水平降低。本研究提示硒干预AIT时可以抑制树突状细胞的成熟，这种抑制作用可能是通过降低胞内ROS水平而抑制NF-κB的激活实现的。在自身免疫甲状腺炎中，Th17细胞起了很重要的作用，硒干预也抑制了Th17细胞的分化，进而减轻了甲状腺自身免疫炎症。