番茄抗细菌性髓部坏死病遗传规律的研究及分子标记筛选

Tomato is one kind of vegetable which is grown all over the world. However,because of the expansion of cultivated area and the improper planting mode, Tomato bacterial pith necrosis has become the main disease which threatens tomato's production. In the experiment, molecular marker technique was applied to investigate resistant genes of Tomato bacterial pith necrosis in tomato, screening AFLP and SSR molecule marker linked to Tomato bacterial pith necrosis resistant gene. In this study tomato resistant cultivar T034 and susceptible cultivar T084 were used and their hybridizing F2 progenies were used as the separating groups.Using Pseudomonas corrugata Roberts et Scarlett as inoculation material, and using conventional inoculation method to establish resistance and susceptibility gene pools. Establishing the AFLP and SSR molecule marker technique system of tomato, and the marker was used to screen tomato plants resistant to Tomato bacterial pith necrosis. The results established the basis for MAS, and then the tomato materials which contained resistant gene could be screened out. These results will provide theoretical basis and technical support for creating new elite germplasms and breeding in resistant rootstocks resources.

番茄是主要茄果类蔬菜之一，近年来，番茄细菌性髓部坏死病严重制约着番茄生产。本项目拟采用经典遗传分析方法,对来源于本研究室已培育的番茄细菌性髓部坏死病抗性资源“T034”抗性遗传规律进行研究及分子标记的开发，试验将“T034”和高感自交系病材“T084”杂交，并构建杂交组合的6个世代(P1,P2,F1,F2,B1,B2)，用接种法对其各世代群体植株进行抗性鉴定,并进行x2的适合性测验，研究抗性遗传规律；利用AFLP和SSR分子标记技术进行对分离世代进行分析，结合表型分析，对抗病基因进行定位，开发出番茄抗髓部坏死病的分子标记。并将该分子标记筛选出的抗病材料利用田间鉴定及接种实验验证该分子标记的实用性、准确性，为后续抗细菌性髓部坏死病的种质创制与新品种选育提供理论依据和技术支持。

番茄是主要茄果类蔬菜之一，近年来，番茄细菌性髓部坏死病严重制约着番茄生产。本研究以抗细菌性髓部坏死病的野生番茄砧木材料（T034）和感细菌性髓部坏死病的栽培番茄砧木材料（T084）为亲本，以引起番茄细菌性髓部坏死病的致病菌菊苣假单胞菌 Pseudomonas cichorii为供试菌，采用穿刺接种法，通过对F2分离群体的极端抗感单株构建基因混池，采用基因组重测序技术结合集群分离分析（BSA），对调控番茄细菌性髓部坏死病的抗性基因进行初步定位，并采用圆盘滤纸法测定不同杀菌剂对病原菌的室内杀菌活性。以抗病砧木材料（T034）和感病砧木材料（T084）为父母本构建F2群体，采用穿刺法接种菊苣假单胞菌，30天后，纵切主茎，观察281 株番茄的发病情况，其中208株表现出感病，73株表现为抗病，发病率为74.02%。利用 BSA-seq，通过选取 ED 关联算法和 SNP-index 关联算法的交集将番茄细菌性髓部坏死病抗性基因初步定位于12号染色体，经与不同数据库注释分析共包含4个候选基因，分别是Solyc12g032940.1.1、Solyc12g082720.1.1、Solyc12g041870.3.1和Solyc12g040860.2.1。采用圆盘滤纸法使用14种市售药剂对抑制 P. cichorii 生长药剂进行筛选。不同药剂的抑菌结果表明6种药剂的毒力强度的大小为硫酸链霉素>荧光假单胞菌>50%氯溴异氰尿酸>47%春雷·王铜>50%福双美>80%代森锰锌，噻菌铜（除10000mg/L 外）及其他7种药剂在试验药剂浓度下对病原菌无抑制作用。本研究为精细定位和基因克隆和探究番茄细菌性髓部坏死病抗性分子机制提供研究基础，为今后分子标记辅助育种和番茄抗病基因定向选育，加快新品种选育提供参考价值，并为番茄细菌髓部坏死病的大田防治提供理论基础。