结构改良对食品蛋白ACE抑制肽LHP生物学效应的影响及机制研究

肽难以穿透小肠黏液层及生物膜且易被消化酶系降解，致使其生物利用度低、作用时间短或活性丧失，这已成为食品蛋白生物活性肽研究与开发的瓶颈。为提高生物活性肽的生物学效应，本课题在已有的工作基础上，提出了酰胺键替换的结构改良方法，利用-COCH2-基团对具有抗高血压活性的ACE抑制肽Leu-His-Pro（LHP）进行酰胺键替换，改良为酮肽，利用人工胃肠液、ACE、Caco-2细胞模型、大鼠在体肠模型等进行理化特性、稳定性、吸收转运机制研究，并进行活性评价及代谢动力学特性研究。在上述实验条件下从多个层面论证ACE抑制肽酰胺键替换的结构改良设想。本课题将从分子、细胞、生物学水平较为全面地探讨LHP结构改良对其生物学效应的影响机制，为研制新型长效肽类ACE抑制剂提供理论依据和实验数据，为生物活性肽的深度开发提供新的思路。

按照申报书及计划书设计的研究内容与路线，本项目以从中国毛虾蛋酶解产物中分离鉴定的ACE抑制三肽LHP为结构蓝本，通过化学合成酰胺键结构替换改良后的LHP-X，对其理化性质、稳定性、吸收转运机制及生物学效应进行研究，结果表明：（1）对ACE抑制肽LHP的酰胺键结构替换改良能改善其理化性质如水溶性、脂溶性；（2）LHP-X在体内对消化酶、ACE的水解抵抗力要强于LHP，结构改良对LHP的ACE抑制活力影响不大，结构变化后LHP-X仍为可逆竞争性抑制剂；（3）LHP结构改良后的LHP-X在偏酸性条件下的吸收性能要好于LHP；（4）LHP-X对原发性高血压大鼠的抗高血效应与LHP相比有一定的提高，且降血压效应持续时间有所延长；（5）LHP、LHP-X的代谢动力学参数表明LHP-X的吸收性能、药效浓度要强于LHP。本项目的研究结果为开发拟肽类新型ACE抑制剂提供参考数据，为食品蛋白生物活性肽的深度开发应用提供新的方向。课题研究期间，发表标注论文4篇，申报发明专利1项；6位研究生参加了课题研究，晋升教授1人，高级实验师1人，达到了人才培养的目的。