长链非编码RNA TPGS2 通过连接蛋白43对内皮祖细胞功能的调节机制及其对深静脉血栓转归影响的实验研究

Endothelial progenitor cell (EPC) plays an important role in the recanalization of deep vein thrombosis (DVT). But the number of EPC and its function are also confined by internal microenvironment, which will impair the roles of recanalizaion in DVT. Thus it is very important to improve the capacities of proliferation, homing and angiogenesis. According to our previous study, we found that the expression of lnc-TPGS2 in EPC from DVT patients was higher than that from healthy donors. Connexin (Cx43) was identified as the target gene of lnc-TPGS2. Besides, miR-206-5P also can target on Cx43 and expressed lower in the cells with lnc-TPGS2 overexpression. Cx43 plays an important role in the proliferation, migration and angiogenesis. Thus, we suspected that lnc-TPGS2 could promote Cx43 expression through the regulation of MiR-206-5P, and further enhance the proliferation, migration and angiogenesis of EPC. In this study, ①. We will find out the role of lnc-TPGS2 in homing and angiogenesis of EPC; ② identify the mechanisms of the regulation of Cx43 by lnc-TPGS2 through miR-206-5P; ③. Explore the role of lnc-TPGS2 in the assessment of DVT prognosis via animal model of thrombosis. This project will provide an important theoretical reference for stem cell treatment of DVT.

内皮祖细胞（EPC）能够促进深静脉血栓形成（DVT）的再通，但易受到机体微环境的影响，使血栓中的EPC数量及功能受到影响，因此如何调控以提高EPC数量及功能显得尤为重要。我们前期发现DVT患者EPC中lnc-TPGS2表达升高，后者参与连接蛋白43（Cx43）的调控。miRNA基因芯片结果及生物信息学分析提示miR-206与lnc-TPGS2存在负向调节关系，同时又可靶向调控Cx43。据此推测lnc-TPGS2可能通过miR-206来调控Cx43表达进而提高EPC在血栓再通中的作用。本研究将①探明lnc-TPGS2对EPC增殖、迁移及成血管能力的影响；②研究lnc-TPGS2通过miR-206来调控Cx43的分子机制；③通过动物血栓模型解析EPC参与调控DVT转归过程中lnc-TPGS2扮演的角色。该项目的完成将丰富了提高EPC数量及功能的新机制，为DVT的干细胞治疗提供重要的理论依据。

内皮祖细胞（EPC）能够促进深静脉血栓形成（DVT）的再通，但易受到机体微环境的影响，使血栓中的EPC数量及功能受到影响，因此如何调控以促进EPC数量及功能显得尤为重要。本项目研究发现DVT患者EPC中lnc-TPGS2表达升高，后者参与连接蛋白43（Cx43）的调控。miRNA基因芯片结果及生物信息学分析提示miR-206与lnc-TPGS2存在负向调节关系，同时又可靶向调控Cx43。据此推测lnc-TPGS2可能通过miR-206来调控Cx43表达进而提高EPC在血栓再通中的作用。为验证这一假说，本项目分别通过迁移侵袭和成血管试验探明lnc-TPGS2对EPC增殖、迁移及成血管能力的影响；通过GST-pulldown、RIP、PCR及western等试验验证lnc-TPGS2通过miR-206来调控Cx43的机制；通过体内血栓模型解析EPC中的lnc-TPGS2在DVT转归中的作用。结果发现lncRNA可通过CeRNA机制来调节EPC中Cx43的表达，进而改变EPC的细胞生物学功能。调控EPC中lncRNA的表达可增加血栓机化再通，对DVT的防治存在重要的潜在应用价值，为干细胞治疗临床棘手的深静脉血栓形成治疗方面提供了科学依据。通过本项目的完成及延伸研究，累计发表相关论文8篇，其中SCI 论文6篇；核心期刊论文2篇，另外通过项目实施，团队学术水平提升，协助培养研究生毕业3人，为后续进一步转化研究提供强有力的理论基础。