应用树鼩模型观察TLR2、9/MyD88信号通路在乙肝疫苗免疫后无(低)应答中的作用及机制研究

The current major way to protect people from infection of hepatitis B virus (HBV)is vaccination of HBV Vaccine. But 5% to 10% people still be susceptible to HBV after vaccinated by HBV Vaccine. Toll-like receptors (TLRs) are key molecules of innate immunity and to start acquired immunity.On the basis of previous studies of the relationship of TLRs and Hepatitis B Virus infection, we will establish the animal model of tree shrew for low-/non-response after vaccination of hepatitis B virus vaccine and detect the TLR2,9/MyD88 pathway's activation and expression of low-/non-responsive persons immunized with standard recombinant hepatitis B vaccine, and further study the mechanisms of abnormal TLR2,9 function or expression in the development of low-/non-response after vaccination of hepatitis B virus vaccine. The findings of this study will help to discover the mechanisms of low-/non-response to vaccination of Hepatitis B Virus Vaccine.

接种乙肝疫苗是防治乙肝病毒(HBV)感染的关键，但健康人群仍有5%～10%接种后未能产生有效免疫力，成为HBV感染的高危人群，且感染后易发展为慢性，进而发展为肝硬化、肝癌。人们发现，固有免疫的信号传导调节是机体启动有效、适度的免疫应答的关键环节，而Toll样受体(TLRs)作为固有免疫细胞表达的模式识别受体，是起动固有免疫和调节适应性免疫的重要分子，对感染及免疫的发生、发展起决定作用。在对以往HBV感染及免疫与Toll样受体的相关性研究和认识的基础上，本项目首先建立乙肝疫苗免疫后无(低)应答树鼩动物模型，进而观察TLR2、9/MyD88信号通路在树鼩乙肝疫苗无(低)应答发生中的作用及机制并研究免疫干预对其无(低)应答状态的影响。研究结果将有助于深入认识乙肝疫苗免疫后无(低)应答的发生机制，可为乙肝疫苗无(低)应答人群进行免疫干预和寻求防治HBV感染相关疾病干预新策略提供科学依据和新思路。

接种乙肝疫苗是防治乙肝病毒（HBV）感染的关键，但健康人群仍有5%～10%接种后未能产生有效免疫力，成为HBV感染的高危人群，且感染后易发展为慢性，进而发展为肝硬化、肝癌。人们发现，固有免疫的信号传导调节是机体启动有效、适度的免疫应答的关键环节，而Toll样受体（TLRs）作为固有免疫细胞表达的模式识别受体，是启动固有免疫和调节适应性免疫的重要分子，对感染及免疫的发生、发展起决定作用。在对以往HBV感染及免疫与Toll样受体的相关性研究和认识，以及本课题组前期抗体芯片检测树鼩蛋白分子分析的基础上，本项目首先建立乙肝疫苗免疫后无(低)应答树鼩动物模型，同时对从人、小鼠、大鼠抗体中筛选出了能用于树鼩检测的抗体检测结果进行了初步验证；期间对大学生群体筛选无（低）应答者并对其进行了乙肝认知、态度和行为，以及补种乙肝疫苗意愿的调查分析；另外，为了拓展对树鼩固有免疫系统在病毒感染和疫苗免疫中的作用认知，以低致病性动物流感病毒感染树鼩，观察树鼩应对病毒感染和其免疫系统抗感染能力的发生发展变化情况。取得的重要成果如下：（1）通过筛选对乙肝疫苗无（低）应答的树鼩，成功建立了乙肝疫苗免疫后无（低）应答树鼩模型，为研究乙肝疫苗免疫后无（低）应答发生机制奠定了基础；（2）初步建立了树鼩TLRs及其信号通路关键分子的检测方法，为应用树鼩作为动物模型研究固有免疫在疾病发生发展中的作用提供了一种可行的检测方案；（3）从在校大学生中筛选出乙肝疫苗无（低）应答者，作为实验对照组；另外，大学生人群调查结果显示，大部分被调查者对乙肝相关知识有一定认识，但是认识度不全面，仍需加大乙肝防控的卫生宣传教育；（4）低致病性动物流感病毒可未经适应跨种属感染树鼩，体内能激发有效的抗病毒固有免疫和适应性免疫应答，提示树鼩具有较完善的免疫功能。因此，本项目的研究成果提示树鼩可作为乙肝疫苗免疫无（低）应答发生机制研究的良好动物模型，也为乙肝疫苗无(低)应答人群进行免疫干预和寻求防治HBV感染新策略提供科学依据。