基于IL-33/ST2信号通路探讨金乌健骨方治疗寒湿阻络型类风湿关节炎的作用机制

The pathogenesy of Rheumatoid Arthritis (RA) is not fully clear. According to the latest study at home and abroad, interleukin-33 is the key factor in Synovitis of RA .It forms inflammatory signal axis through combined with receptor ST2,then mediated its occurance ,evelopment and bone destruction in joint synovitis of RA. Therefore, blocking the IL-33/ST2 signal pathway and regulator gene-related may be a potential therapeutic target. RA belong to Cold Wind Bone of Miao medicine,the research group combined the theory cold coagulation and blood stasis with toxic ,according to principle of Abolish poison,propose warm tendon dispelling cold.Under the guidance of this theory, we taked mainly to compose JinWu JianGu recipe. it presented the successful treatment on the basis of previous clinical and experimental research.So,the team propose the inflammatory axis of IL-33/ST2 is the key factor of occurrence and development in synovitis of RA.Miao medicine JinWu JianGu herbs probably by regulating IL-33/ST2 signal pathway correlated gene, remission in synovitis of RA. we will establish the cold-damp stagnation type of animal and cell models to study IL-33/ST2 inflammatory signal axis, it may expore new Chinese herbal with therapy of RA.

类风湿关节炎（RA）的发病机制尚不完全清楚。据最新国内外研究证实，白介素33（IL-33）是RA滑膜炎症的关键因子，通过与其受体ST2结合形成IL-33/ST2炎症信号轴，介导RA关节滑膜炎症的发生、发展和骨质破坏。因此，阻断IL-33/ST2信号通路及相关调节基因可能是RA治疗的潜在靶点。RA属于苗医学“冷骨风”范畴，课题组将中医寒凝血瘀理论与苗医“痹毒”理论相结合，根据苗医“毒以去为法”的原则，提出“温筋散邪”法，应用苗药为主组成金乌健骨方，在前期临床和实验研究中取得良好疗效。因此，课题组提出IL-33/ST2炎症轴是RA滑膜炎症发生和持续的关键因素，苗药金乌健骨方可能通过调节IL-33/ST2信号相关基因，缓解RA滑膜炎症的科学假说，并在前期研究的基础上通过建立寒湿阻络型RA动物和体外细胞模型，探讨金乌健骨方对IL-33/ST2炎症信号轴的调控机制，可能为RA的治疗发掘新的民族用药。

类风湿关节炎（RA）的发病机制尚不完全清楚。据最新国内外研究证实，IL-33/ST2炎症信号轴介导RA关节滑膜炎症的发生、发展和骨质破。RA属于苗医学“冷骨风”范畴，课题组将中医寒凝血瘀理论与苗医“痹毒”理论相结合，提出“温筋散邪”法。本研究分为动物实验和细胞实验。动物实验：将105只Wistar大鼠随机分为7组，分别为空白对照组、CIA模型组、金乌健骨方高、中、低剂量组和强的松、雷公藤对照组。ELISA法检测CIA模型组大鼠血清中IL-33、IL-6、INF-γ及IL-17表达量比空白对照组明显上调。金乌健骨方各剂量给药组及强的松、雷公藤对照组大鼠血清中IL-33、IL-6、INF-γ及IL-17表达量较CIA模型组相比较均有不同程度的下调。RT-PCR检测结果：CIA模型组滑膜组织中IL-33、sST2 mRNA的表达比空白对照组明显上调，而ST2L mRNA的表达则明显下调。金乌健骨方各剂量组滑膜组织中IL-33 mRNA、sST2 mRNA的表达与CIA模型组比较均有下调作用，而ST2LmRNA均呈不同程度上调。Western Blot检测CIA模型组大鼠比空白对照组滑膜组织中IL-33、sST2蛋白表达明显上调，ST2L蛋白表达明显降低。金乌健骨方中、高给药组相比CIA模型组对滑膜中IL-33、sST2有不同程度的下调作用，对ST2L有上调作用。细胞实验：纳入符合标准的RA患者滑膜组织，进行原代培养、鉴定并将细胞传代至3-5代，分为6组：空白对照组、强的松、雷公藤多苷对照组、金乌健骨方高、中、低剂量组。RT-PCR检测发现：相比空白对照组，各含药血清给药组sST2、IL-33mRNA表达量显著下调，ST2L mRNA表达量显著上调；与强的松、雷公藤多苷对照组比较，金乌健骨方高剂量组sST2、ST2L、IL-33mRNA表达量调节作用均无统计学差异。Western Blot检测结果：相比空白对照组，各含药血清给药组sST2、IL-33蛋白表达水平有所下调，ST2L蛋白表达升高。以上研究表明金乌健骨方能够下调炎性因子IL-33、IL-6、INF-γ、IL-17的表达，上调ST2L的表达，促进IL-33与ST2L的结合，金乌健骨方通过调节IL-33/ST2信号相关基因，调节免疫失衡，缓解RA滑膜炎症。